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目的:研究丙戊酸钠(valproic acid sodium salt，VPA)联合17-雌二醇（17-estradiol，E2）对淀粉样蛋白前体蛋白（-amyloidprecursor protein，APP）/早老素1（presenilin1，PS1）双重转基因卵巢切除阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease，AD）模型小鼠行为学和脑内β淀粉样蛋白（Amyloid β peptide, Aβ）的影响及其相关机制。本课题实验结果不仅将为研究和开发多靶向药物防治AD这一多因异质性疾病提供实验室依据，同时将对这种具有性别差异的疾病实施个性化治疗方案提供强有力的证据。方法:1对APP/PS1双重转基因AD模型种鼠繁殖后代进行基因分型，选取3月龄APP/PS1双转基因小鼠雌鼠40只，并切除卵巢，随机平均分为4组，分别为生理盐水组、VPA组、E2组、VPA联合雌激素治疗组，每组10只。VPA组小鼠给予VPA30mg/kg·d，雌激素组给予E22.4ug/只·d，VPA和E2联合治疗组给予VPA30mg/kg·d和E22.4ug/只·d，生理盐水组注射等量生理盐水，均为腹腔注射。2药物注射4周后，先采用高架十字迷宫以检测各组小鼠的抑郁行为；Morris水迷宫实验检测小鼠的空间学习记忆能力；然后取脑组织进行免疫组织化学检测小鼠脑内老年斑（Senile plaques，SP）改变。3对各组小鼠脑内ER进行免疫组化和Western blot检测，明确其表达和分布。4、对PS1、BACE1、P-GSK3、MAPK信号转导通路等采用Western blot进行检测，研究VPA联合E2治疗后对小鼠脑内SP数量及行为学产生影响的相关机制。结果:1、行为学结果1）高架十字迷宫实验结果显示：小鼠在开臂活动次数上，与生理盐水组比较，VPA组、E2组和VPA联合E2组均明显增加（P＜0.05）；联合治疗组与VPA组和E2组相比无显著差异（P>0.05）；在开臂停滞时间上，与生理盐水组比较，VPA联合E2组显著增加（P＜0.01），VPA组明显增加（P<0.05），E2组无明显差异；联合治疗组与E2组相比明显增加（P<0.05），与VPA组相比无明显差异（P>0.05）。在开臂活动次数百分比和开臂滞留时间百分比上，与生理盐水组相比，VPA联合E2组显著增加（P＜0.01），VPA组和E2组明显增加（P<0.05）；联合治疗组较VPA组和E2组也明显增加（P<0.05）。2）水迷宫实验结果显示：可视平台下，各组小鼠找到平台的时间和游泳速度均无显著差异（P>0.05）。隐蔽平台下，与生理盐水组相比，其他各组小鼠找到平台的时间及搜索的平均路程明显缩短（P＜0.05）；而联合治疗组也明显少于VPA组和E2组（P＜0.05）。空间探索实验穿越平台的次数中，与生理盐水组比较，VPA联合E2组显著增加（P＜0.01），VPA组和E2组也明显增加（P＜0.05）；与联合治疗组比较，VPA组明显减少（P＜0.05），E2组显著减少（P＜0.01）。2、老年斑及其相关分泌酶检测结果免疫组织化学结果显示：在小鼠大脑皮质和海马的SP数量上，与生理盐水组比较，VPA联合E2组明显减少（P＜0.01），VPA组和E2组无明显差异（P>0.05）；联合治疗组明显少于VPA组和E2组（P＜0.05）。Westren blot结果显示：PS1蛋白含量在各组中无明显差异（P>0.05）。在BACE1蛋白表达上，与生理盐水组相比，VPA联合E2组显著下降（P＜0.01），VPA组明显下降（P＜0.05），E2组无明显改变（P>0.05）；与联合治疗组比较，VPA组明显上升（P＜0.05），E2显著上升（P>0.05）。3、雌激素受体及磷酸化GSK-3检测免疫组化结果显示：与生理盐水组比较，VPA组、E2组、VPA联合E2组小鼠脑内ER明显增加（P＜0.05）；VPA组和E2组较联合治疗组无明显差异（P>0.05）。WB结果显示：ER与免疫组化得到相同的结果。在磷酸化GSK-3蛋白表达水平上，与生理盐水组比较，VPA组和VPA联合E2组显著上调（P＜0.01），E2组无明显改变（P>0.05）。4、MAPK信号转导通路相关蛋白检测Western blot结果显示：在Pp38蛋白表达水平上，与生理盐水组比较，E2组、VPA联合E2组显著下调（P＜0.05），VPA组无显著差异（P>0.05）；与VPA联合E2组比较，E2组明显上调（P＜0.05），VPA组显著上调（P＜0.01）。在PJNK蛋白表达上，与生理盐水组相比，VPA联合E2组显著下调（P＜0.01），VPA组和E2组明显下调（P＜0.05）；与VPA联合E2组比较，VPA组和E2组明显上调（P＜0.05）。在PERK1/2蛋白水平上，与生理盐水组比较，VPA组无显著变化（P>0.05），E2组和VPA联合E2组显著上调（P＜0.01）；与联合治疗组比较，VPA组显著下调（P＜0.01），E2明显下调显（P＜0.05）。在总p38、JNK、ERK1/2蛋白表达水平上，各组小鼠均无明显差异（P>0.05）。结论:1、VPA能恢复ER活性，并提高雌激素的敏感性，使雌激素发挥正常生理功能2、VPA联合E2治疗可减轻APP/PS1双转基因卵巢切除AD模型小鼠的抑郁状态；也能显著改善其空间学习记忆能力。3、VPA联合E2治疗APP/PS1双转基因卵巢切除AD模型小鼠后，能减少小鼠脑内A的沉积及老年斑的形成，其可能机制是抑制BACE1活性、上调PERK1/2、下调PJNK、Pp38有关。