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近年来,纳米高分子聚合物微粒作为一种优良的载体,已广泛用于基因、药物及造影剂的传递。本论文主要研究了带半乳糖配体的psiRNA基因载体和多功能聚合物囊泡载体两方面内容。
阳离子聚合物聚乙烯亚胺(PEI)作为一种新型的非病毒基因载体,在肝脏疾病的基因治疗中有广泛的应用前景。由于哺乳动物的肝细胞表面含有去唾液酸糖蛋白(ASGP)受体,能专一性的识别和结合半乳糖残基,为提高PEI运载psiRNA对肝细胞的转染效率,本文合成了半乳糖偶联聚乙二醇接枝支化聚乙烯亚胺(Gal—PEG—hy—PEI)和聚乙二醇接枝支化聚乙烯亚胺(PEG—hy—PEI)两种共聚物,并对其psiRNA复合物的基本理化性质(如粒径、Zeta电位、稳定性、细胞毒性等)和对psiRNA在肝细胞的体外转染进行了研究。研究表明,随着Gal—PEG—hy—PEI与psiRNA的N/P增高,复合物的粒径随之减小而Zeta电位升高。复合物Gal—PEG—PEI/psiRNA对肝细胞的转染效果依赖于N/P,在N/P为8时达到最高的转染效率37.34%,远大于复合物PEG/psiRNA或lipofectamine2000/psiRNA。在含有游离半乳糖的环境中,复合物Gal—PEG—PEI/psiRNA对肝细胞的转染效率从37.34%降到3.60%,Gal—PEG—hy—PEI载体表现出良好的肝细胞靶向性,且其细胞毒性较小,因而在肝脏疾病的基因治疗方面有较好的应用前景。
针对干细胞的MRI活体示踪和聚合物纳米囊泡的研究背景,本论文制备了以聚合物聚乙二醇—聚丙交酯(PEG—PDLLA)为基材,装载核磁共振显像剂Gd—DTPA的聚合物囊泡,并研究了其基本的理化性质(粒径、形貌、Gd—DTPA的包覆率、MRI显像效果)。通过实验证实了,Gd—DTPA能被装载于聚合物囊泡的亲水性内腔里,装载Gd—DTPA的聚合物囊泡粒径为100~200nm,并表现出很好的MRI成像效果,用聚合物囊泡装载Gd—DTPA用作MRI成像对比剂具有可行性。本文还尝试对烯丙基—聚乙二醇—聚丙交酯(Allyl—PEG—PDLLA)进行改性,探索合成带端氨基的NH2-PEG—PDLLA的方法。研究表明,通过水相自由基加成反应制备带正电荷的囊泡基材NH2-PEG—PDLLA的路线不易实现,需要更改另一种合成方法,合成NH2-PEG—PDLLA。