(-)γ-内酰胺是合成治疗艾滋病新药阿巴卡韦(abacavir)的重要中间体。与化学催化剂相比,固定化细胞生物催化剂不仅具有很高的立体选择性,并且可以重复利用。因此,利用固定化细胞进行(±)γ-内酰胺的手性拆分,具有广泛的应用前景。本课题以已筛选得到的产γ-内酰胺水解酶的菌株Microbacterium hydrocarbonoxydans L29-9为实验菌株,以固定化细胞的机械强度、酶活力(产物(-)γ-内酰胺收率)和立体选择性(e.e.值)作为主要考察指标对固定化细胞进行研究。优化了固定化细胞的制备条件：以6%聚乙烯醇和1%海藻酸钠作为复合载体材料,在3%硼酸中添加2%氯化钙(pH 6.7)作为交联剂,以1mL175 mg/mL菌悬液制备一份固定化细胞,固定化细胞凝胶珠体静止浸泡在交联剂中置于4℃下进行硬化处理1h,即得一份固定化细胞。优化了固定化细胞批次生物转化条件：一份固定化细胞加入到去离子水配制的20 mL 1 g/Lγ-内酰胺溶液(pH7.0)中,摇床震荡,30℃,220r/min,转化3h。优化了固定化细胞批次生物转化间隔时期的保存条件：一份固定化细胞浸泡在40mL0.5mM K+溶液中,置于4℃下冷藏保存。经过一系列优化实验后,进行了固定化细胞生物转化稳定性的研究,在最优条件下,固定化细胞生物转化产物(-)丫-内酰胺收率为34%,e.e.值>99%,批次转化可进行14次,在9次转化内,收率和e.e.值均没有明显下降。