【摘 要】
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目的明确滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物贝氏柯克斯体感染情况及其差异,分析贝氏柯克斯体的基因多态性,提供鼠形动物感染贝氏柯克斯体的基线水平,为评估Q热在野外鼠形动物与人类之间发生和流行的风险,有效预防和控制Q热疫情提供科学依据。方法课题组于2015年12月至2016年10月,在玉龙县、剑川县和梁河县的不同季节、不同海拔梯度、不同地理景观,使用夹夜法捕获野外鼠形动物,对鼠形动物进行解剖,共收集到2524份
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目的明确滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物贝氏柯克斯体感染情况及其差异,分析贝氏柯克斯体的基因多态性,提供鼠形动物感染贝氏柯克斯体的基线水平,为评估Q热在野外鼠形动物与人类之间发生和流行的风险,有效预防和控制Q热疫情提供科学依据。方法课题组于2015年12月至2016年10月,在玉龙县、剑川县和梁河县的不同季节、不同海拔梯度、不同地理景观,使用夹夜法捕获野外鼠形动物,对鼠形动物进行解剖,共收集到2524份肝脾样本。使用磁珠法提取肝脾样本的DNA,采用巢氏PCR针对Q热病原体贝氏柯克斯体(Coxiella burnetii,简称Cb)ComⅠ基因的部分保守片段进行扩增,进行分子生物学检测。应用Excel2010和SPSS17.0软件采用卡方检验和精确概率检验法对比分析不同疫源地鼠种、性别、生境、海拔梯度、季节因素Cb在野外鼠形动物的流行分布情况。运用软件Megalign和MEGA7.0分析Cb阳性样本的同源性并构建系统发育树,探索其进化来源。结果1.检测滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物的2524份DNA样本,Cb阳性23份,阳性率为0.91%。Cb阳性的动物是齐氏姬鼠0.64%(5/780)、中华姬鼠2.19%(6/274)、黄胸鼠0.54%(1/184)、社鼠3.64%(2/55)、锡金小鼠1.37%(1/73)、大绒鼠1.03%(5/485)、臭鼩鼱4.08%(2/49)和毛猬1.96%(1/51)。2.玉龙鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb阳性率为0.34%,剑川鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb阳性率为1.46%,梁河鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb阳性率为0.80%,剑川鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb阳性率高于玉龙鼠疫疫源地(P<0.05)。3.剑川鼠疫疫源地海拔2450m以上野外鼠形动物Cb阳性率高于2450m以下野外鼠形动物Cb阳性率(P<0.05)。4.滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb阳性率春季高于秋季(P<0.05)。玉龙鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb阳性率冬季高于其它季节(P<0.05);剑川鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb阳性率春季高于夏冬两季(P<0.05)。5.滇西鼠疫疫源地不同种类野外鼠形动物Cb感染情况无显著性差异(P>0.05);雄性和雌性野外鼠形动物Cb感染情况无显著性差异(P>0.05);不同生境的野外鼠形动物Cb感染情况无显著性差异(P>0.05);玉龙和梁河鼠疫疫源地不同海拔野外鼠形动物Cb感染情况无显著性差异(P>0.05);梁河鼠疫疫源地不同季节野外鼠形动物之间Cb感染情况无显著性差异(P>0.05)。6.同源性和系统发育分析都证明了滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb ComⅠ序列和Genebank相关参考序列高度同源,其中玉龙鼠疫疫源地野外鼠形动物部分样本Cb基因相似性有别于其他地区,其余样本之间并无明显差异。结论1.滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb阳性率较低(0.91%),感染Cb的鼠形动物包括齐氏姬鼠、中华姬鼠、黄胸鼠、社鼠、锡金小鼠、大绒鼠、臭鼩鼱和毛猬。2.剑川鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb阳性率高于玉龙鼠疫疫源地,剑川鼠疫疫源地海拔2450m以上野外鼠形动物Cb阳性率高于2450m以下野外鼠形动物Cb阳性率。3.滇西鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb阳性率春季高于秋季。玉龙鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb阳性率冬季高于其它季节,剑川鼠疫疫源地野外鼠形动物Cb阳性率春季高于夏冬两季。4.滇西鼠疫疫源地Cb ComⅠ基因片段在野外鼠形动物中呈现出高度保守的流行与分布;玉龙鼠疫疫源地Cb基因相似性有别于其他地区。
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