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目的:运用脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）诱导BV2小胶质细胞建立神经炎症反应模型,探讨富血小板血浆（Platelet-Rich Plasma,PRP）对BV2小胶质细胞中枢神经炎症的抗炎作用及其相关机制,为下一步更深入的机制研究及今后的临床使用提供理论依据。方法:通过二次离心法制备富血小板血浆（PRP）,再用血细胞分析仪计数全血和PRP中血小板（PLT）数量。使用BV2小胶质细胞进行体外实验,其在含10%胎牛血清（Fatal Bovine Serum,FBS）的高糖DMEM/F12完全培养基常规培养,检测不同时间段内细胞OD值并绘制生长曲线,取生长特性最佳阶段的细胞进行实验。采用CCK-8法（Cell Counting Kit-8）检测不同浓度PRP和LPS以及两者联合使用对BV2细胞正常生长的增殖作用。Western blot检测炎症因子的表达水平,为后续实验制定合理的用药浓度范围。实验分为六组,分别为Control组（正常对照组）、10%PRP组、LPS组、3%PRP+LPS组、5%PRP+LPS和10%PRP+LPS组六个组;利用LPS（1μg/m L）诱导BV2小胶质细胞活化,建立体外神经炎症模型。经不同浓度的PRP预处理1h后,再使用LPS激活BV2小胶质细胞。用TUNEL和JC-1法测定细胞凋亡水平,Griess测定NO浓度,实时荧光定量PCR（RT-q PCR）分析IL-1β、IL-6、TNF-α、i NOS、COX-2和IL-4 m RNA的表达水平。ELISA测定IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2和IL-4细胞因子变化水平。Western blot分析TLR4、p-IκB和p-NF-κB/P65蛋白的表达水平。激光共聚焦显微镜评估p-NF-κB/P65亚基核移位情况。用抑制剂TAK-242抑制TLR4受体,通过Western blot和ELISA测定PRP处理的BV2细胞中p-NF-κB/P65和促炎细胞因子的表达情况,探索PRP的抗炎作用是否通过TLR4受体介导NF-κB信号通路产生抗神经性炎症作用。结果:血小板（PLT）计数显示,PRP中PLT的数量约为全血的2-5倍,达到实验要求,激活后方可使用。生长曲线显示,BV2细胞生长状况良好时段为传代培养后的2-3d。CCK-8与Western blot结果显示,与Control组（正常对照组）比较,较低浓度PRP（≤10%）对细胞无毒性作用,且能明显的促进细胞增殖（P＜0.05）,但浓度过高（≥15%）会抑制细胞增殖（P＜0.01）。与Control组比较,1μg/m L的LPS浓度对细胞没有毒性作用,并且该浓度下炎症因子IL-6和TNF-α的表达量最高（P＜0.01）,因此后续实验LPS浓度固定为1μg/m L。与Control组比较,不同浓度PRP和LPS（1μg/m L）联合使用对BV2细胞无毒性作用。与LPS组比较,1%PRP不能降低炎症因子的表达,因此采用三个浓度PRP（3%、5%、10%）进行后续实验。细胞凋亡分析结果表明,与Control组比较,LPS组细胞内DNA断裂碎片增多以及线粒体膜电位水平下降（P＜0.01）;与LPS组比较,不同浓度PRP（3%、5%、10%）剂量依赖方式降低了DNA片段产生,并且增加了细胞线粒体膜电位水平。RT-q PCR结果显示,与Control组比较,LPS组促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α和促炎相关酶i NOS、COX-2 m RNA的表达明显增高（P＜0.01）,而抗炎因子IL-4的表达受到了抑制（P＜0.01）;与LPS组比较,不同浓度PRP（3%、5%、10%）剂量依赖性抑制了炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和促炎相关酶i NOS、COX-2的表达,此外PRP促进了抗炎细胞因子IL-4 m RNA的表达。ELISA和Griess法结果显示,与Control组比较,LPS组促炎介质IL-1β、IL-6、TNF-α、NO和PGE2产生水平明显增高（P＜0.01）,IL-4分泌减少（P＜0.01）;与LPS组比较,PRP降低了促炎介质IL-1β、IL-6、TNF-α、NO和PGE2的生成,并进一步增加了IL-4的产生。不同浓度PRP抑制了LPS刺激产生的炎症介质并能促进IL-4的表达和分泌（P＜0.05）,且10%PRP的作用能力最显著。Western blot显示,与Control组相比,LPS组TLR4表达升高（P＜0.01）,NF-κB通路关键蛋白IκBα和NF-κB/P65磷酸化水平明显增高（P＜0.01）;与LPS组比较,PRP抑制了LPS诱导的TLR4的表达以及p-IκBα、p-NF-κB/P65的激活（P＜0.05）,PRP浓度为10%抑制效果最好。激光共聚焦显微镜显示,与Control比较,LPS组p-NF-κB/P65核移位明显增加;与LPS组相比,不同浓度PRP降低了p-NF-κB/P65的表达和核移位水平。以此同时,使用TLR4抑制剂TAK-242结果显示,与Control比较,LPS组p-NF-κB/P65的表达和炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α产生增加（P＜0.01）;与LPS组相比,TLR4抑制剂TAK-242能降低LPS诱导的p-NF-κB/P65蛋白活化,减少炎症介质的分泌。此外,TAK-242+LPS组与TAK-242+LPS+10%PRP组相比,p-NF-κB/P65和炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α产生无统计学差异。结论:PRP能够抑制LPS激活的BV2小胶质细胞炎症介质IL-1β、IL-6、TNF-α、NO和PGE2的产生,促进抗炎因子IL-4的生成,减少细胞凋亡。其机制可能是PRP通过降低TLR4/NF-κB信号通路的激活从而起到抗BV2细胞神经炎症反应作用。