上调Caprin-1的表达对胶质瘤U251细胞的增殖和迁移能力的影响

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目的:通过检测Caprin-1在脑胶质瘤临床标本中的表达情况及干预脑胶质瘤U251细胞株细胞周期相关蛋白1(Caprin-1)的表达,观察其对胶质瘤细胞株生物学特性的影响,为胶质瘤的基因靶向治疗和评估胶质瘤的预后提供理论依据。方法:收集31例临床标本,采用免疫组化分析Caprin-1的表达和胶质瘤分级的关系。以U251细胞作为实验对象,构建Caprin-1高表达的U251细胞稳转株。实验分为三组:空白对照组(野生型U251细胞),阴性对照组(转染pEGFP-C1质粒的U251细胞),实验组(转染pEGFP-C1-Caprin-1质粒的U251细胞)。采用脂质体lipofectamine 3000转染U251细胞,RT-PCR检测三组细胞Caprin-1mRNA的表达及Western blot分别检测三组细胞Caprin-1蛋白、Akt磷酸化水平和cyclinD1蛋白表达水平,实时细胞分析仪和增强型CCK-8试剂盒检测其增殖能力变化及划痕实验和Transwell小室迁移实验检测其迁移能力的变化。结果:免疫组化检测结果表明Caprin-1在胶质瘤标本中的表达主要位于胞膜和胞浆,且其表达量随肿瘤组织的恶性程度增加而增高;在细胞实验中,RT-PCR和Western blot检测结果表明,与两对照组相比,实验组Caprin-1 mRNA及其蛋白和Akt磷酸化水平和cyclinD1蛋白表达水平均增高,而两对照组其表达量差异无统计学意义;实时细胞分析仪和增强型CCK-8试剂盒检测结果表明,与两对照组相比,实验组细胞增殖速度更快(P?0.05),而两对照组其增殖速度差异无统计学意义;划痕实验和Transwell小室迁移实验结果表明,与两对照组相比,实验组细胞迁移能力增强(P?0.001),而两对照组细胞迁移能力差异无统计学意义。结论:Caprin-1在胶质瘤标本中的表达量随肿瘤组织的恶性程度增加而增高。上调U251细胞Caprin-1的表达则其增殖和迁移能力显著提高。
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