慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞和细胞毒性T细胞表面NK相关受体的表达

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背景:乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染的慢性化是医学的难题。HBV进入机体后,宿主的细胞免疫状态是其识别并清除病毒(急性自限性)抑或持续感染慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)的关键因素,与疾病的预后转归密切相关。分别司职抗病毒固有免疫和获得性免疫功能的自然杀伤(Natural Killer,NK)细胞和细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)的表面 NK相关激活性受体和抑制性受体的表达格局与机体抗病毒免疫应答水平密切相关。  目的:探讨CHB患者NK细胞和CTL其表面NK相关受体的变化格局,了解CHB患者NK细胞和CTL对HBV免疫应答的受体途径。  方法:用流式细胞术分析40例CHB患者(HBV-DNA阳性18例,HBV-DNA阴性22例)和20例健康对照外周血NK细胞和CTL百分率及其表面NK相关的激活性受体(NKG2D和NKp30)和抑制性受体(NKG2A和KIR2DL3)的表达水平;用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)测定患者HBV-DNA载量,用连续监测法检测患者血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平。用化学发光微粒子免疫分析法分析 CHB患者 HBV感染血清学标志物。统计分析两组间上述指标的差异及其与HBV-DNA载量和肝脏损伤标志物等的相关性。  结果:CHB患者与健康对照组外周血NK细胞百分率差异无统计学意义,但NK细胞中CD56dimNK的百分率显著低于健康对照组(P<0.05);CHB患者外周血总 NK细胞中表达 NKG2A的细胞比例显著高于健康对照组(P<0.05),CD56dimNK细胞和CD56brightNK细胞中表达NKG2A的细胞比例亦均显著高于健康对照组(P<0.05)。CHB患者与健康对照组外周血T细胞百分率差异无统计学意义,但外周血T细胞中CTL百分率均显著低于健康对照组(P<0.05);CTL表面表达KIR2DL3的比例显著高于健康对照组(P<0.05)。HBV-DNA阳性CHB患者组总 NK细胞和 CD56dimNK细胞中表达 NKG2A的细胞比例均显著高于HBV-DNA阴性组(P<0.05);HBV-DNA阳性CHB患者组外周血T细胞CTL百分率显著低于HBV-DNA阴性组(P<0.05),HBV-DNA阳性CHB患者组CTL中表达KIR2DL3的细胞比例显著高于HBV-DNA阴性组(P<0.05)。相关性分析结果显示,CHB患者总NK细胞表达NKG2D和NKG2A的比例分别与表达NKG2D和NKG2A的CTL的比例呈显著正相关(r分别为0.49和0.589,P<0.01);CHB患者外周血中表达NKG2A的CTL比例与血清HBV-DNA和ALT水平呈显著相关(r分别为0.58和0.671,P<0.01);表达KIR2DL3的CTL比例与HBeAg呈显著正相关(r=0.556,P<0.01)。  结论:CHB患者外周血NK细胞和CTL的百分率及其表面表达NK相关受体的细胞比例发生变化,该变化与HBV复制水平、疾病的活动度以及肝损伤指标呈显著正相关。NK相关抑制性和激活性受体表达格局的变化致使NK细胞和CTL活性受损和免疫应答紊乱,导致乙肝病毒不能得到有效清除,引起肝细胞损伤。NK细胞和CTL表面NK相关受体表达水平可望成为CHB病情评估的新指标以及CHB治疗的潜在新靶点。
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