甘蓝型油菜BnaFIL基因克隆与启动子分析

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gs086449
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
甘蓝型油菜(Brassica napus,AACC,2n=38),作为全球最重要的油料作物之一,在我国广泛种植。在中国乃至全世界,油菜是继水稻、大豆、玉米和小麦之后的第五大作物,也是食用油和重要的蛋白质来源。同时油菜除了具有食用价值外,在化工、医药、生物能源等行业对油菜也有巨大需求。油菜适时开花不仅影响着油菜的产量和品质,同时也决定了其对生态区域的适应性。因此,油菜开花时间早晚是油菜育种的重要目标性状之一。我们利用全基因组重测序和高密度基因芯片对开花时期相关基因进行挖掘,找到一个与开花期早晚相关的基因FIL(FILAMENTOUS FLOWER),在早花与晚花品种中的FIL基因存在一个SNP位点位于该基因的第五内含子上。我们从甘蓝型油菜中分离BnaFIL基因及其启动子,进行了基因表达和启动子功能研究。1、利用芸薹属60K SNP芯片对203份中国半冬性油菜自交系材料中与油菜开花相关基因进行全基因组关联分析,检测出FIL基因上有一个SNP位点,该位点位于A03染色体上且与开花早晚有着显著关联;进行荧光定量PCR检测,结果显示早花材料与晚花材料中BnaFIL基因表达量存在差异,晚花材料中BnaFIL基因表达量低,早花材料中BnaFIL基因表达量高。2、从12个不同开花时期的材料中克隆出BnaFIL基因的DNA序列,序列大小为2312 bp。经比对发现早花与晚花间存在一个SNP位点,且该位点位于第五内含子。对克隆获得的BnaFIL基因进行生物信息学分析后结果显示,BnaFIL定位在细胞核内且BnaFIL与同属十字花科的拟南芥FIL基因的亲缘关系最近。3、对该基因的启动子进行克隆。Plant CARE分析发现早花与晚花材料中均存在CAAT-box元件、TATA-box元件等顺式反应元件,同时发现早花与晚花材料的启动子存在两个不同的SNP位点。4、构建BnaFIL基因启动子表达载体pBnaFIL-GUS,将重组质粒导入土壤农杆菌GV3101,采用花序浸染法将含有重组质粒的农杆菌转入拟南芥,使重组质粒在拟南芥中表达。结果显示,GUS基因在早花材料启动子的驱动下表达比在晚花材料启动子的驱动下的表达强度要高。
其他文献
为探究不同播期对再生稻生长发育及产量的影响,本研究于2019年在长沙市金井镇进行,裂区试验设计,以播种时期为主区,即3月15日(B1)、3月20日(B2)、3月25日(B3)、3月30日(B4)、4月5日(B5)、4月10日(B6),品种为副区,即徽两优898(HLY898)、Y两优900(YLY900)、Y两优911(YLY911),观测了生育期、干物质积累动态、产量及其产量构成等指标。主要结果
学位
水稻是我国最重要的粮食作物,在水稻生长和发育中锌是不可或缺的微量元素,同时也是人体不可或缺的营养元素。我国长期以来,水稻生产中重化肥、轻有机肥,重大量元素肥料轻中微量元素肥料施用的现象普遍,造成了土壤板结、酸化、有机质含量下降、土壤微生物功能多样性下降等一系列突出问题,从而严重影响了土壤生理生化特性,使得土壤中一些有利于人体健康的元素不断缺失。因此在双季稻地区提高粮食单产、改善土壤肥力、增加水稻的
学位
学位
为明确头季秸秆还田对再生稻再生季生长发育及产量的影响,于2019年在湖南省益阳市大通湖区千山红镇开展了大田试验研究。试验采用裂区设计,品种为主区,还田处理(秸秆不还田+常规灌溉、秸秆还田+湿润灌溉、秸秆还田+淹水灌溉、秸秆还田+湿润灌溉+腐熟剂、秸秆还田+淹水灌溉+腐熟剂)为副区,以甬优4149和Y两优911为供试品种,主要研究结果如下:1、使用腐熟剂和水分管理加速了秸秆还田后的腐解率,进而促进了
学位
高收获指数型超级稻品种的选育和应用是实现水稻高产高效生产的一条有效途径。但水稻产量不仅与品种有关,它还受栽培管理措施(如氮肥运筹)等的影响。氮肥施用不当不仅会影响水稻产量形成,还会导致氮肥利用效率降低和植株倒伏等一系列问题。但目前还未见有关氮肥运筹(施氮量和施氮比例)对高收获指数型超级稻产量形成和抗倒性的影响的报道。据此,本研究以高收获指数型超级稻品种桂两优2号为试验材料,设2个施氮量(N1=15
学位
<正>电容器作为电子元器件在各种电器中都有广泛的应用,能够起到调谐、耦合、旁路、滤波等作用,教材上及各类考试中均有体现.对于高中物理电场部分内容,建立物理场景比较难,授课教师往往只能“纸上谈兵”,学生学习起来也有很大难度,成绩往往不尽人意.对此物理教师和学生需要改变自己,积极进行实践和探索,在实践中提高认识,建立符合认知规律的物理场景,消除认知障碍.下面以电容器充放电为例简要分析.
期刊
2023年是《保护非物质文化遗产公约》通过20周年纪念,落实可持续发展理念的要求是进一步实施的方向所在。自2016年《实施〈保护非物质文化遗产公约〉的操作指南》第六章明确可持续发展理念下的15个优先领域以来,该理念的相关要求也在近年逐渐清晰。通过对UNESCO非遗名录评审案例的归纳,可持续发展理念具有两层要求:一是非遗本身的可持续性要求,主要体现在应对过度商业化引发的问题;二是发挥非遗对人类可持续
期刊
湘南地区光热资源丰富,雨水充足,适宜发展双季稻,但其降雨时空分布不均,且丘陵坡耕地较多,保水蓄水能力较弱,严重影响水稻的高产稳产。为探索适宜湘南双季稻的灌溉方式与化学调控剂,以中嘉早17和盛泰优018为材料,于2019-2020年在湖南省衡阳县开展了大田试验,比较研究了灌溉方式(淹水灌溉,W1;间歇灌溉,W2;湿润灌溉,W3)和化学调控(壮谷饱,C1;壳寡糖,C2;胺鲜酯,C3;不化控,C4;天达
学位
笔者选择饲用活性干酵母、酿酒酵母细胞壁和啤酒酵母(酵母培养物),测定水分、粗灰分、钙、磷、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、无氮浸出物等营养成分含量,以期比较酵母细胞和酵母细胞壁的营养成分,并进行形态学鉴定。采用美兰染色法,对活性干酵母、酿酒酵母细胞壁和啤酒酵母进行染色,在光学显微镜下观察与鉴定形态学差异。结果活性干酵母,酿酒酵母细胞壁和啤酒酵母的干物质、磷、粗纤维含量均无显著差异(P>0.05);与酿酒酵
期刊
蔗糖转运蛋白(sucrose/H+cotransporters或sucrose transporters,SUCs/SUTs)参与植物对生物和非生物胁迫的响应,研究其在植物抗病反应中的功能可为挖掘新的抗病途径打下基础。OsSUT2影响植株生长发育,主要参与蔗糖从液泡到胞质的跨液泡膜转运,并将糖从源叶输出到库器官。本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得OsSUT2敲除突变体材料,通过病原菌
学位