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目的: 采用细胞图像光度术(ICM),检测鼻咽癌组织肿瘤细胞核的DNA干系倍体的状态,结合其增殖细胞核抗原(PCNA与Ki-67)的免疫组化检测,分析鼻咽癌细胞核的DNA干系倍体及其异质性与其病理分型、临床分期的关系,并探讨应用细胞图像光度术分析组织原位肿瘤细胞DNA干系倍体的某些方法学问题。方法: 选取42例鼻咽癌病例的归档蜡块,制备4μm、8μm连续组织学切片,每一病例选取三个癌巢或不同的肿瘤组织区域(共126个样本)。4μm组织切片测量鼻咽癌细胞核DNA的光密度等参数,8μm组织切片测量单个完整鼻咽癌细胞核的体积等参数,计算获得每一癌巢或肿瘤组织区域的以单个完整鼻咽癌细胞核的体积为单位的DNA含量(以体积积分光密度表述),以同一切片内正常鼻咽部上皮非基底细胞作为其内参照,计算其DNA干系倍体;采用免疫组化SP法进行PCNA和Ki-67染色,以采样样本为单位,计数阳性反应细胞数,计算阳性表达率。结果: (1)鼻咽癌细胞核的DNA干系倍体主要集中在1.76~3.00(DNA指数为0.88~1.50)之间。126个检测样本中14(11.11%)个样本为DNA近干系四倍体,仅有2个样本为DNA干系亚二倍体。 (2)不同病理分型的鼻咽癌中均检测到DNA干系倍体异质性,异质性率为66.67%(28/42);14例鼻咽癌无DNA干系倍体异质性,其中10例为DNA干系二倍体肿瘤,4例为DNA干系非整倍体肿瘤。26例(61.90%)为DNA干系异倍体肿瘤。 (3)“>5C细胞数”在DNA干系异倍体与二倍体鼻咽癌中有显著性差异(P<0.05);但鼻咽癌DNA干系异倍体及异质性率在不同的临床分期、病理分型之间无显著性差异。 (4)37例鼻咽癌进行了PCNA与Ki-67的免疫组化染色,100%的病例有PCNA的阳性表达,33例(89.19%)有Ki-67的阳性表达;Ki-67的阳性表达率低于PCNA的(P<0.05)。 一 K)DNA$数与鼻咽癌PCNA及Ki67的阳性表达率均无相关关系。 历)采用相同的测量方法,4叩组织切片上测得的细胞核体积明显小于sp。组织切 片上测得的(Prto.05)。 结论: (1)不同病理分型鼻咽癌中均存在有洲A干系倍体异质性: (2)洲A干系异倍体鼻咽癌的“>sc细胞数”明显高于洲A干系二倍体的;鼻咽癌 不同病理分型、临床分期的DNA干系倍体异质性及异倍体率无显著性差异; (3)DNA干系倍体与细胞增殖状态无关。 0)利用TIGER细胞图像分析仪,在组织原位测量厚、薄连续组织切片上肿瘤细胞 核的光密度和体积等参数,计算以单个完鳖鼻咽癌细胞核体积为单位的DNA含量,分 析肿瘤细胞核DNA干系倍体状态及其异质性是可行的,而且具有一定的优越性。