【摘 要】
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目的:探讨促红细胞生成素对全脑缺血大鼠模型海马CA1区神经元的神经保护机制。 方法:选用体重200～250g雄性SD大鼠,随机分组,实验组、EPO治疗组各30只,对照组6只。实验组大
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目的:探讨促红细胞生成素对全脑缺血大鼠模型海马CA1区神经元的神经保护机制。 方法:选用体重200～250g雄性SD大鼠,随机分组,实验组、EPO治疗组各30只,对照组6只。实验组大鼠制作全脑缺血模型,EPO治疗组是在全脑缺血模型基础上每天给予EPO(4000U/公斤体重)腹腔注射。对照组大鼠,每天给予生理盐水1ml腹腔注射,三天后处死。按照缺血后再灌流时间点6h,12h,24h,48h和72h,实验组和EPO治疗组各又随机分为5小组。 采用Pulsinelli法闭合大鼠四动脉建立全脑缺血模型。大鼠以10%水合氯醛(300mg/kg)腹腔麻醉,颈部正中切开皮肤,分离暴露双侧颈总动脉,置线备用。同时枕部切口暴露第一颈椎翼小孔,用电凝针烧灼双侧翼小孔内的椎动脉,造成永久性闭塞。24h后于清醒状态下用动脉夹夹闭双侧颈总动脉,造成全脑缺血,15min后松开夹闭,使血流再灌注,缝合创口后放置回笼。手术过程中及术后出现惊厥和偏瘫的,及阻断动脉时15～30秒未出现翻正反射和角膜反射消失的动物弃之不用。各组随时补充缺少的大鼠。 各组动物到时间后再次麻醉,经升主动脉插管,肝素生理盐水100ml冲洗,4%多聚甲醛酸盐缓冲液(4℃,pH7.4)灌注约400ml,取脑浸入上述固定液中,梯度酒精脱水,二甲苯透明,石醋包埋,冠状连续切片,切片厚度6μm。常规HE染色,在普通光镜下观察组织病理学变化,20×10倍下计数海马CA1区锥体细胞总数。按照武汉博士德公司TUENL试剂盒说明书进行TUNEL染色。用计算机图像仪软件Image Pro Plus处理TUNEL染色片,计算海马CA1区每个高倍镜
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