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目的:蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage,SAH)是一种急性危重脑血管疾病,具有高致死致残率的特点。以往在讨论其高死亡率的原因时认为主要是脑血管痉挛(Cerebral vascular spasm,CVS)造成的,但投入大量研究后收效甚微。目前研究认为,早期脑损伤(Early brain injury,EBI)才是SAH后高致死率和不良预后的主要原因。本研究通过构建大鼠SAH模型,并外源性调控过氧化物酶体增殖物激活受体β/δ(Peroxisome proliferator activated receptor,PPARβ/δ)的表达检测对EBI的损伤的影响,初步探讨其作用机制。方法:1、选用SD雄性大鼠128只,通过视交叉前池注射自体未肝素化动脉血构建SAH模型,随机分为Part I和Part II两部分,第一部分进行侧脑室注射过表达腺病毒(Ad),第二部分侧脑室注射干扰RNA(si RNA),每部分4组:Part I:假手术组、SAH组、SAH+Ad-GFP组、SAH+Ad-PPARβ/δ组;Part II:假手术组、SAH组、SAH+si-CON组、SAH+si-PPARβ/δ组。使用神经功能学评分和平衡木实验检测各组大鼠SAH后6h、12h和24h的行为学改变;在SAH后1h、6h、12h和24h监测大鼠脑血流(Cerebral blood flow,CBF)的变化。通过伊文思蓝(Evans Blue,EB)渗出率和干湿重法分别检测各组大鼠SAH后24h血脑屏障(Blood brain barrier,BBB)通透性和脑水肿的变化,原位末端标记法(Terminal deoxynucleotidyl transferase d UTP nick end labeling,TUNEL)用来检测大鼠SAH后24h海马组织的神经元凋亡程度,并使用Western Blot检测大鼠海马组织紧密连接蛋白Occludin、Claudin-5、Zonula occludens-1(ZO-1)和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase3的表达情况。2、动物模型的构建以及分组情况同上,首先使用免疫组织化学染色和Western Blot方法检测大鼠海马组织PPARβ/δ蛋白的表达情况。使用明胶酶谱法检测各组大鼠基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的活性变化,使用Western Blot检测MMP-9、NF-κB、c-Fos、TGF-β1的表达情况。结果:1、大鼠SAH模型构建成功后24h内其死亡率为33.3%,并可见明显的神经功能障碍和脑血流量的减少。Ad-PPARβ/δ的处理在SAH后12h内未见明显变化,但在24h观察到其明显改善大鼠SAH后行为学功能,促进脑血流的恢复,减少死亡率;而使用si-PPARβ/δ后上述改善症状消失,与SAH组大鼠相比甚至发现神经功能障碍进一步加重,在SAH后24h的脑血流恢复也更加缓慢。2、SAH后24h大鼠BBB破坏明显,且伴有严重的脑水肿,过表达PPARβ/δ可减少EB渗出,上调ZO-1的表达,但对Occludin和Claudin-5的表达变化没有影响;PPARβ/δ沉默组观察到BBB的通透性进一步加重,与SAH组相比ZO-1的丢失也更加严重,而Occludin和Claudin-5仍然没有太大变化,与SAH组的差异无统计学意义。3、TUNEL检测显示大鼠SAH后海马组织神经细胞凋亡明显,凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Cleaved-caspase3的表达明显增加,Ad-PPARβ/δ的治疗下调了Bax和Cleaved-caspase3表达,增加了Bcl-2的表达量;与SAH组相比,si-PPARβ/δ的处理会增加Bax和Cleaved-caspase3的表达而减少Bcl-2的表达水平。4、PPARβ/δ在大鼠海马组织中主要在神经细胞胞浆内表达,胞核内也有少量表达,SAH后24h PPARβ/δ的表达减少,Ad-PPARβ/δ和si-PPARβ/δ的处理能够分别上调和下调PPARβ/δ的表达水平。Western Blot检测结果显示大鼠SAH后MMP-9的活性和表达量均增加,而随着PPARβ/δ的过表达可明显降低海马组织MMP-9的活性并减少其表达量,PPARβ/δ沉默又得到相反的结果,MMP-9活性增加并表达上调。NF-κB的表达变化表现出与MMP-9相一致的趋势,而c-Fos和TGF-β1仅检测到在SAH后表达增加,未表现出与PPARβ/δ表达的相关性。结论:1、PPARβ/δ能够降低大鼠SAH的死亡率,通过促进CBF恢复改善EBI后的神经功能障碍;2、PPARβ/δ在SAH后能够促进ZO-1的表达,改善BBB损伤,减轻脑水肿的程度;3、PPARβ/δ在SAH后可减少神经细胞凋亡,并改善早期脑损伤;4、PPARβ/δ在EBI中发挥神经保护作用可能是通过下调NF-κB/MMP-9通路实现的。