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以天津茶淀玫瑰香(Muscat Hamburg)葡萄品种为试材,用固相微萃取(solid-phase microextraction,SPME)技术、气相色谱/质谱/计算机联用技术对不同栽培模式、不同套袋处理、灌施不同生物肥以及不同贮藏期的玫瑰香葡萄果实中挥发性成分进行了分析鉴定,以筛选出更有利于香气成分积累的栽培模式,初步建立优质玫瑰香葡萄质量评价系统。对不同产地、不同器官组织、不同生长时期、无核化处理的玫瑰香葡萄果实中主要活性物质(原花色素、黄酮、多酚)的含量、动态变化及其抗氧化活性方面进行了研究,为利用玫瑰香葡萄废弃物多层次综合开发和深加工产品提供理论依据。
1、不同的萃取头对于不同种类的物质具有选择性吸收,玫瑰香葡萄中香气物质的种类和含量差别较大,无论从萃取物质的种类和含量,CAR/DVB/PDMS萃取头均优于DVB/PDMS和PDMS萃取头,使用50/30μmCAR/DVB/PDMS萃取头能较好地萃取玫瑰香葡萄的挥发性香气成分。玫瑰香葡萄果实中检测到的挥发性香气物质,主要以醇类和醛类为主,包括醇类、醛类、酸类、酯类及其他物质,以3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇和(E)-2-己烯醛含量最高。
2、通过对不同栽培模式、不同套袋处理、灌施不同生物肥的成熟期玫瑰香葡萄果实中挥发性香气成分的对比分析,结果表明:
不同的葡萄栽培架式对葡萄果实香气种类稍有影响,对玫瑰香挥发性香气成分的相对含量的总量影响较大。篱架玫瑰香葡萄果实中检测到挥发性香气物质36种,Y型架玫瑰香葡萄果实中检测到挥发性香气物质共40种,两种架式栽培的玫瑰香葡萄果实中检测到的相同成分共29种,包括醇类12种、醛类6种、酸类3种、酯类2种、其他物质6种。其中醇类物质的相对含量在不同架式的玫瑰香葡萄果实中有较大差别,篱架玫瑰香葡萄果实中醇类物质的相对含量为46.44%,Y型架玫瑰香葡萄果实中醇类物质相对含量则为60.24%。同时发现相对含量较高的几种醇类物质受不同架式的影响较大,如沉香醇、à,à4-三甲基-3-环己烯-1-甲醇的相对含量在篱架玫瑰香葡萄果实中分别为10.67%、3.45%,而在Y型架玫瑰香葡萄果实中则分别为40.69%、7.04%;而橙花醇、香叶醇在篱架玫瑰香葡萄果实中的相对含量分别为5.51%、15.93%,而Y型架玫瑰香葡萄果实中则为1.18%、3.37%;醛类物质在篱架、Y型架两种架式的玫瑰香葡萄果实中均有较高的相对含量分别为43.6%和34.52%,主要为己醛和(E)-2-己烯醛两种醛类物质;酸类物质在两种架式玫瑰香葡萄果实中种类相同,相对含量不同,篱架、Y型架玫瑰香葡萄果实中相对含量分别为4.95%、1.19%,主要为香叶酸,其在篱架、Y型架栽培的玫瑰香葡萄果实中的相对含量分别为4.47%和0.77%;酯类物质的相对含量在两种架式玫瑰香葡萄果实中均较低,在篱架、Y型架玫瑰香葡萄果实中的酯类物质相对含量分别为0.67%和0.35%。
结果表明Y型架栽培的葡萄中香气成分的相对含量总量和总数均高于单臂篱架,Y型架比单臂篱架栽培架式有利于玫瑰香葡萄果实中醇类物质的积累。在香气成分含量变化明显的成分主要为沉香醇、à,à4-三甲基-3-环己烯-1-甲醇、橙花醇、香叶醇、香叶酸,这几种成分的相对含量与玫瑰香香气浓郁程度呈正相关,这与前人的研究结果一致,也与田间结果表现一致。从理论上充分说明了在葡萄生产中应用Y型架式栽培有利于增加葡萄果实香气,可显著提高葡萄果实内在品质,对我国优质葡萄生产的架式改革提供了理论依据。
不同套袋处理方式对玫瑰香葡萄果实品质影响较大,套袋和采前取袋处理的葡萄较不套袋采收葡萄的可溶性固形物含量、穗重、单粒重均有明显增加。从套袋采收和采前取袋的玫瑰香葡萄果实中分别检测到37种和36种香气成分,两者共检测到43种香气成分,其中检测到的相同的成分共有31种,包括醇类12种、醛类7种、酯类和酸类各为3种、其他成分6种。带袋采收和采前取袋处理的玫瑰香中检测到的香气物质的总峰面积分别为1.21×1010和1.40×1010,说明采前取袋有利于香气成分的积累。
施用不同营养肥(液体生物肥、超高磷钾和果实美)处理的葡萄香气物质的种类差别不大,但相对含量具有明显的差别,主要香气成分为沉香醇、橙花醇、香叶醇、(E)-2-己烯醛等。包括对照在内的四种处理方式的玫瑰香葡萄中共检测出香气物质46种,相同的成分有25种,包括醇类12种、醛类4种、酯类1种、酸类3种,其他物质5种。其中施用超高磷钾肥、液体生物肥、果实美和对照组的果实中检测到香气物质分别为37种、38种、35种和34种,施用三种肥料的玫瑰香葡萄香气成分的总峰面积均大于对照,这说明施加营养肥有可增加香气成分种类和有利于香气成分积累;同时发现施用超高磷钾肥、液体肥和果实美的玫瑰香葡萄中香气物质的总量均高于对照组的香气含量。用液体肥的玫瑰香葡萄果实硬度明显高于施用超高磷钾、果实美的处理及未处理对照。从田间现场效果看,施用液体肥后,果实较其他处理外观靓丽,色彩鲜艳。
玫瑰香葡萄在不同贮藏时期果实的香气成分的种类总数差别不大,以醛类和醇类物质为主,酸类、酯类和其他物质相对含量较低。但在贮藏阶段香气成分变化较大,如苯乙醛在贮藏期O-30d时检测到存在,45d时无法检测到;3-呋喃甲醇在0-15d时没有检测到,但在贮藏期为30d和45d时均能检测到。相同的香气成分在不同的贮藏时期相对含量也不同,如(E)-2-己烯醛随着贮藏期的延长,其相对含量逐渐下降,而橙花醇的相对含量则呈上升趋势:香叶酸的相对含量则先下降后上升。从第15d开始可检测到少量的乙醇存在,说明葡萄的无氧呼吸作用出现,随着贮藏期的延长,玫瑰香葡萄的代谢途径发生改变,香气成分的种类和相对含量受到影响。
3、玫瑰香葡萄不同器官组织中黄酮、原花色素、总酚等活性物质含量的比较结果表明酚类物质在葡萄中的分布并不均匀,不同器官组织间的含量差异极其显著。叶片内的总酚和类黄酮含量显著高于其他器官组织,为果皮含量的1.08~1.4倍,为卷须的1.60~3.68倍,其他依次为果皮>卷须≥茎>果肉;而原花色素的含量在果皮中最高,为叶片的1.56~2.22倍,卷须的18.62~38.28倍,其他依次为叶片>卷须≥茎>果肉;卷须中酚类物质含量较高,总酚和类黄酮的含量可达10 mg/gFW和3 mg/gFw左右;对不同产地玫瑰香葡萄植株中的酚类物质进行分析,结果显示西庄坨玫瑰香葡萄优系不同器官组织中原花色素、黄酮的含量均高于其他地区的玫瑰香葡萄植株。葡萄各个器官组织清除自由基的能力与它们各个时期的酚类物质含量变化基本一致,呈显著正相关,表明葡萄的抗氧化能力主要来自于其中所含的多酚类物质。果皮和叶片有很高的清除自由基的能力,茎和卷须也有较高清除自由基的能力,而果肉的抗氧化能力最低。
对GA3诱导无核化处理的玫瑰香葡萄植株叶片、嫩茎、卷须中酚类物质含量和抗氧化活性的测定发现:叶片、嫩茎、卷须中酚类物质含量要高于对照植株,对ABTS和DPPH两种自由基的清除能力也明显高于对照器官;在果皮和果肉中,无核化处理果实的酚类物质含量明显低于对照,对照果实的清除能力大于无核化处理的果实。