论文部分内容阅读
目的：
研究人眼外肌栅栏状神经终末(Palisade Endings,PEs)结构的形态、分布和功能,观察其在先天性眼球震颤(Congenital Nystagmus,CN)中发生的改变,探讨CN的病因和发病机制,并为指导临床治疗提供理论依据。
方法：
眼肌手术时留取眼外肌远端的部分,标本分为CN组和对照组(斜视患者),两组再按相近年龄大小(差别<3岁)、相同取材部位严格配对,分别进行以下观察。
1.眼外肌及眼外肌栅栏状终末的透射电镜观察
CN患者14例。共同性斜视患者18例。
斜视手术中取下肌肉组织迅速用4％戊二醛-蔗糖添加二甲胂缓冲液进行前固定后,自附着点处向后每1mm切取1～2块横断的小长条状组织,进行电镜标本处理,最后将两组标本按相近年龄和相同取材部位进行严格配对。透射电镜观察眼外肌及眼外肌PEs的超微结构和分布。
2.眼外肌栅栏状终末的激光扫描共聚焦显微镜观察
CN患者5例。共同性斜视患者26例。
斜视手术中取下标本立即用4％多聚甲醛固定,肌-腱连接区整体经胆碱乙酰转移酶抗体标记、肌纤维经鬼笔环肽对比染色后,行25μm厚的纵、横断面连续冰冻切片,激光扫描共聚焦显微镜下观察PEs的胆碱乙酰转移酶表达情况、形态及分布。于内直肌距附着点4mm处,两组分别进行横断面的PEs计数。应用SPSS11.5统计学软件处理数据。采用两个独立样本t检验进行分析。以P<0.05作为差异有统计学意义。
3.眼外肌肌-腱连接区胆碱乙酰转移酶的Western blot检测
CN患者和共同性斜视患者各3例。
两组选取相同部位的肌-腱连接区组织,提取组织蛋白,进行胆碱乙酰转移酶的Western blot检测分析。应用SPSS11.5统计学软件处理数据。采用两个独立样本t检验,对CN组与对照组眼外肌肌-腱连接区胆碱乙酰转移酶阳性表达量的灰度值进行比较。以P<0.05作为差异有统计学意义。
结果：
1.眼外肌及眼外肌栅栏状终末的透射电镜观察
与对照组相比,CN组PEs的结构水肿,电子密度增高呈明显的嗜锇酸样改变；肌细胞内线粒体肿胀,肌浆网扩张、空泡化。
2.眼外肌栅栏状终末的激光扫描共聚焦显微镜观察
人眼外肌的PEs为胆碱乙酰转移酶抗体标记阳性。眼外肌纵断面切片可见,供应PEs的神经纤维起自肌肉,延伸入腱后返回,发出栅栏状分支,分布于肌纤维末端。内直肌在附着点后约3～4mm处PEs的分布最为集中。横断面切片可见阳性标记的PEs呈点状分布于肌纤维间。CN组PEs的数量明显多于对照组,有统计学差异(t=-5.613,P<0.05)。
3.眼外肌肌.腱连接区胆碱乙酰转移酶的Western blot检测
两组眼外肌肌-腱连接区的胆碱乙酰转移酶表达均呈阳性。且两组的阳性表达差异具有统计学意义(t=-3.730,P<0.05),CN组高于对照组。
结论：
1.人眼外肌栅栏状终末为胆碱能神经,分布于眼外肌远端的肌-腱连接区,可能与眼外肌的收缩有关。
2.先天性眼球震颤患者的眼外肌栅栏状终末结构发生了明显改变,可能导致异常的眼球运动。