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目的：研究脊髓TLR4/p38MAPK/TNF-a信号通路在大鼠SMIR持续性术后痛中的作用。 方法：(1)选择鞘内置管成功的雄性SD大鼠96只，随机分为4组(n=24)：假手术组、皮肤肌肉切口牵拉模型组(SMIR组)、SMLR+鞘内阴性对照siRNA组(scramble siRNA组)和SMIR+鞘内TLR4siRNA组(TLR4siRNA组)。假手术组和SMIR组于术前1d和术后1-6d鞘内注射人工脑脊液(ACSF)20μl，1次/d；scramblesiRNA组和TLR4siRNA组于术前1d和米后1-6d分别鞘内注射scramble siRNA(2μg/10μl)和TLR4siRNA(2μg/10μl)，1次/d并在每次注药后经导管注射ACSF10μg冲洗导管。(2)选择鞘内置管成功的雄性SD大鼠120只，随机分为5组(n=24)：假手术组、SMIR组、SMIR+鞘内DMSO溶媒剂组(DMSO组)、SMIR+鞘内SB203580组(SB203580组)和SMIR+鞘内TLR4siRNA组(TLR4siRNA组)。假手术组和SMIR组于术前30min和术后1-12d鞘内注射ACSF20μl，1次/d；DMSO组和SB203580组于术前30min和术后1-12d分别鞘内注射SB203580(5μg/10μl)和DMSO(2％，10μl)，TLR4siRNA组于术前1d和术后1-12d鞘内注射TLR4siRNA(2μg/10μl)，1次/d，并在每次注药后经导管注射ACSF10μl冲洗导管。(3)选择鞘内置管成功的雄性SD大鼠120只，随机分为5组(n=24)：假手术组、SMIR组、SMIR+鞘内TLR4siRNA组(TLR4siRNA组)、SMIR+鞘内SB203580组(SB203580组)和SMIR+鞘内rhTNFR：Fc组(rh TNFR：Fc组)。假手术组和SMIR组于术前1d和术后1-12d鞘内注射ACSF20μl，1次/d；TLR4siRNA组和rh TNFR：Fc组于术前1d和术后1-12d分别鞘内注射TLR4siRNA(2μg/10μl)和rh TNFR：Fc(50μg/10μl)，SB203580组于术前30min和术后1-12d鞘内注射SB203580(5μg/10μl)，1次/d，并在每次注药后经导管注射ACSF10μl冲洗导管。采用Flatters法建立大鼠SMIR持续性术后痛模型；于术前1d及术后第1d、3d、7d、12d和22d测定机械缩足反应阈值(MWT)；采用western印迹法(Western blotting)检测脊髓TLR4、p-p38MAPK蛋白表达的变化；采用ELISA法观察大鼠脊髓TNF-a含量的变化；应用免疫荧光组织化学染色方法观察脊髓TLR4与小胶质细胞活化标记物Iba1表达情况。 结果：(1)与术前及假手术组比较，SMIR组和scramble siRNA组大鼠术后第3d、7d、12d和22d MWT明显降低(P<0.05)；术后第3d、7d、12d脊髓TLR4蛋白表达明显增加(P<0.05)；与SMIR组比较，TLR4siRNA组术后第3d、7d和12d MWT明显升高(P<0.05)，术后第3d、7d和12d脊髓TLR4蛋白表达明显降低(P<0.05)；免疫荧光组织化学双标染色显示脊髓小胶质细胞活化标记物Iba1和TLR4共表达。 (2)与术前基础值及假手术组比较，SMIR组和DMSO组大鼠在术后第3d、7d、12d和22d MWT明显降低(P<0.05)，术后第7d、12d和22d脊髓p-p38MAPK蛋白表达明显增加(P<0.05)；与SMIR组比较，SB203580组和TLR4siRNA组大鼠在术后第3d、7d和12d MWT明显升高(P<0.05)，术后第7d、12d和22d脊髓p-p38MAPK蛋白表达明显降低(P<0.05)。(3)与术前基础值及假手术组比较，SMIR组大鼠在术后第3d、7d、12d和22d MWT明显降低(P<0.05)，术后7d、12d和22d天脊髓TNF-a含量明显升高(P<0.05)；与SMIR组比较，TLR4siRNA组、SB203580组和rh TNFR：Fc组大鼠在术后第3d、7d和12d MWT明显升高(P<0.05)，术后第7d、12d和22d脊髓TNF-a含量明显降低(P<0.05)。 结论：在本实验条件下，脊髓TLR4/p38MAPK/TNF-a信号通路参与了大鼠SMIR持续性术后痛的形成。