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目的:探讨3种不同耐药性肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae,KP）形成生物膜的能力,评价不同种类消毒剂对不同耐药性肺炎克雷伯菌的抗菌活性及对生物膜的抑制和清除作用,为更好地控制肺炎克雷伯菌在院内的感染和传播提供依据。方法:收集不同科室住院患者感染性标本中分离的肺炎克雷伯菌,分为敏感组、产超广谱β-内酰胺酶（Extended spectrumβ-Lactamases,ESBLs）组和耐碳青霉烯类（Carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP）组,每组各15株。采用微量肉汤稀释法测定碘伏、洗必泰、戊二醛、新洁尔灭和84消毒液对肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度（Minimum inhibitory concentration,MIC）和最低杀菌浓度（Minimum bactericidal concentration,MBC）并测定不同浓度的各消毒剂杀菌所需时间;体外构建3种不同耐药性肺炎克雷伯菌生物膜模型,采用结晶紫染色法连续7天测量590nm处的光密度(OD590)来检测不同耐药性肺炎克雷伯菌生物膜的生长趋势;采用结晶紫染色法联合激光扫描共聚焦荧光显微镜研究洗必泰、新洁尔灭和84消毒液对肺炎克雷伯菌生物膜的形成抑制能力和清除能力。结果:3组菌测得的各种消毒剂MIC和MBC相同,碘伏的MIC为256μg/ml、MBC为512μg/ml;戊二醛的MIC为2500μg/ml、MBC为5000μg/ml;洗必泰的MIC为16μg/ml、MBC为32μg/ml;新洁尔灭的MIC为32μg/ml、MBC为64μg/ml;84消毒液的MIC为1000μg/ml、MBC为2000μg/ml。另测得不同浓度的消毒剂对3组菌的杀菌时间略有不同,2000μg/ml洗必泰、3000μg/ml新洁尔灭、20000μg/ml戊二醛和5000μg/ml碘伏杀菌时间均为5min,5000μg/ml84消毒剂杀菌时间为10min。3组肺炎克雷伯菌生物膜体外培养后其OD590值逐日升高,至第5天达到高峰。加入不同消毒剂后,3组肺炎克雷伯菌第1-5天的OD590值逐渐增多,但与阳性对照组相比均有所下降。第5天16μg/ml洗必泰组、32μg/ml新洁尔灭组和1000μg/ml84消毒液组的OD590值与阳性对照组相比差异均有统计学意义（P＜0.05）。16μg/ml洗必泰对各组肺炎克雷伯菌生物膜抑制率分别为敏感组:77.29%,ESBLs组:78.55%,CRKP组:76.86%;32μg/ml新洁尔灭对各组肺炎克雷伯菌生物膜抑制率分别为敏感组:84.59%,ESBLs组:81.73%,CRKP组:83.98%;1000μg/ml84消毒液对各组肺炎克雷伯菌生物膜抑制率分别为敏感组:36.30%,ESBLs组:36.25%,CRKP组:38.31%。在生物膜成熟后加入不同浓度消毒剂,2000μg/ml洗必泰和5000μg/ml84消毒液作用下3组肺炎克雷伯菌的OD590值与空白对照组相比均有所下降且差异均有统计学意义（P＜0.05）,2000μg/ml84消毒液作用下3组菌的OD590值与空白对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。1000μg/ml洗必泰对各组肺炎克雷伯菌生物膜清除率分别为敏感组:7.95%,ESBLs组:6.92%,CRKP组:7.69%;2000μg/ml洗必泰对各组肺炎克雷伯菌生物膜清除率分别为敏感组:19.75%,ESBLs组:18.16%,CRKP组:16.13%;1000μg/ml新洁尔灭对各组肺炎克雷伯菌生物膜清除率分别为敏感组:6.11%,ESBLs组:6.65%,CRKP组:6.95%;2000μg/ml 84消毒液对各组肺炎克雷伯菌生物膜清除率分别为敏感组:5.03%,ESBLs组:4.86%,CRKP组:5.16%;5000μg/ml 84消毒液对各组肺炎克雷伯菌生物膜清除率分别为敏感组:12.86%,ESBLs组:15.13%,CRKP组:16.02%。结论:敏感型、ESBLs型和CRKP型3种不同耐药性肺炎克雷伯菌形成生物膜的能力无差异。5种消毒剂中,洗必泰和新洁尔灭对敏感型、ESBLs型和CRKP型的肺炎克雷伯菌的抗菌作用最强。洗必泰、新洁尔灭和84消毒液对3种不同耐药性肺炎克雷伯菌生物膜均有抑制作用,且新洁尔灭和洗必泰对生物膜的抑制作用强于84消毒液。洗必泰和84消毒液对3种耐药性肺炎克雷伯菌生物膜均有清除作用,且洗必泰的清除作用强于84消毒液。