【摘 要】
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目的:观察缺氧时M一3(神经营养因子一3)对体外大鼠大脑皮质神经元c—jun表达的影响,探讨M-3对大鼠大脑皮质神经元的保护作用及作用机理。 方法:体外原代培养大鼠大脑皮质神经
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目的:观察缺氧时M一3(神经营养因子一3)对体外大鼠大脑皮质神经元c—jun表达的影响,探讨M-3对大鼠大脑皮质神经元的保护作用及作用机理。
方法:体外原代培养大鼠大脑皮质神经元,以石蜡油封闭造成缺氧条件,分为常规培养组与缺氧培养组(两组依M~3终浓度不同各分成四个亚组:0、l、30、100ng/ml组),以光镜、电镜观察细胞在缺氧条件下的形态学变化,MTT法比较各组细胞的活力,并采用RT—PCR、免疫细胞化学法(ICC)及Western—blot法检测各组细胞c—junmRNA及蛋白水平的表达。
结果:石蜡油封闭能诱导神经元缺氧;M一3对常规神经元有维持存活作用,对缺氧神经元有明显保护作用,NT-3能够促进神经元突起生长,减轻缺氧损害;RT一PCR、ICC及Western—blot法分别从基因与蛋白水平显示M一3能够上调常规与缺氧培养神经元c—jun的表达且呈剂量依赖性。
结论:M一3能够促进常规神经元的存活,减轻缺氧对大脑皮质神经元的损害作用,可能通过上调c—jun的表达而促进神经元的生长,提高其活力。
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