EZH2基因在前列腺癌中的表达及其功能研究

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目的检测EZH2基因在前列腺癌PC-3细胞株、LNCAP细胞株和前列腺癌组织中的表达水平并分析该基因与前列腺癌临床病理特征之间的关系;同时观察EZH2基因在前列腺癌PC-3细胞株放射治疗前后表达的改变并探讨该基因的功能机制,为前列腺癌的诊断和靶向治疗寻找新的分子生物学指标。方法1、应用Western-Blot蛋白印记法检测EZH2在前列腺癌PC-3细胞、LNCAP细胞和前列腺正常上皮RWPE细胞中的蛋白表达水平;2、在临床上收集35例前列腺癌组织和8例前列腺增生组织,应用RT-PCR逆转录多聚酶链反应和Western-Blot蛋白印记法检测EZH2在前列腺癌和前列腺增生组织中的mRNA表达水平和蛋白表达水平,并分析EZH2与前列腺癌的临床病理特征之间的关系。3、应用Western-Blot蛋白印记法检测在放射治疗前列腺癌PC-3细胞株前后EZH2的蛋白表达改变。结果1、EZH2在PC-3细胞和LNCAP细胞中的蛋白表达明显高于RWPE细胞[4.485(3.181,4.774),1.235(1.138,1.302) vs 0.588(0.394,0.649)],EZH2蛋白在前列腺各细胞株间的表达具有显著差异性(P<0.01)。2、EZH2 mRNA在前列腺癌与前列腺增生组织中的表达有显著性差异(1.69±0.19 vs 0.79±0.10,P<0.05);EZH2蛋白在前列腺癌与前列腺增生组织中的表达差异有统计学意义(1.67±0.20 vs 0.62±0.10,P<0.05)。3、EZH2在T3-T4期患者的蛋白表达量高于T1-T2期(T3-T4:2.514±0.2809 vs T1-T2:0.9322±0.07062),两组比较差异有统计学意义(P<0.01);EZH2在有淋巴结转移时的蛋白表达量高于无淋巴结转移时的表达量(N1:3.293±0.3566 vs N0:1.177±0.09800),两组比较差异有统计学意义(P<0.01);EZH2在有远处转移的蛋白表达量高于无远处转移时的表达量(M1:3.808±0.4843 vs M0:1.342±0.1261),两组比较差异有统计学意义(P<0.01);EZH2在激素非依赖性前列腺癌中的蛋白表达量高于雄激素依赖性前列腺癌中的表达量(AIPC:2.535±0.5326 vs ADPC:1.357±0.1386),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);EZH2的蛋白表达在前列腺癌患者的年龄、PSA值及Gleason评分中无统计学意义(P>0.05)。4、PC-3细胞在放疗后EZH2蛋白均低表达,PC-3细胞在放疗前EZH2蛋白高表达,两组间具有显著性差异[0.8681(0.667,1.012) vs 3.181(2.793,4.485),P<0.05];PC-3细胞在放疗后的各个时间点间EZH2蛋白的表达未见显著性差异(P>0.05)。结论1、EZH2在前列腺癌PC-3细胞株和LNCAP细胞株中的蛋白表达水平显著高于前列腺正常上皮RWPE细胞株,这说明EZH2可能在前列腺癌的发生发展中发挥着重要的调控作用。2、EZH2 mRNA和蛋白在前列腺癌组织中的表达水平均显著高于前列腺增生组织,且与前列腺癌的临床分期呈正相关,提示EZH2可以作为诊断前列腺癌的新指标。3、EZH2在激素非依赖性前列腺癌中表达水平高于激素依赖性前列腺癌,提示EZH2可能在前列腺癌的激素非依赖性转化过程中起着一定的作用。4、EZH2蛋白在电离辐射后的PC-3细胞株中低表达,这说明电离辐射能使前列腺癌PC-3细胞中的EZH2表达量显著下降。
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