2009年中国4省马铃薯晚疫病菌群体特性分析及其交配型分子标记的开发

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马铃薯晚疫病作为马铃薯生产上的最重要病害之一,由致病疫霉[Phytophthora infestans (Mont.) de Bary]引起。本研究对2009年采自黑龙江、吉林、云南和内蒙4省共137株马铃薯晚疫病菌的交配型,甲霜灵抗性和118株晚疫病菌的生理小种进行了表型测定。并利用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)、简单序列重复(SSR)和扩增片段长度多态性(AFLP)等分子标记技术对采集到的自育菌株进行了基因型分析。同时,利用扩增DNA多态性(RAPD)技术对致病疫霉分子标记的开发进行了初步研究,主要研究结果如下。1、测定了2009年采自黑龙江、吉林、云南和内蒙4省137株马铃薯晚疫病原菌的交配型,除云南32个菌株均为自育菌株外其余各地菌株均为A1交配型,未发现A2交配型。2、对4省137株马铃薯晚疫病菌甲霜灵抗性测定显示,被测的46株黑龙江省晚疫病菌菌株中,甲霜灵抗性和敏感菌株各占被测菌株的50%;被测48个吉林省晚疫病菌菌株中,甲霜灵抗性、敏感菌株比例分别占被测菌株的70.8%、29.2%。黑龙江和吉林均未发现中抗菌株。被测32株云南晚疫病菌菌株,对甲霜灵抗性、中抗、敏感菌株比例各占53.1%、3.1%、43.8%。被测11株内蒙古晚疫病菌菌株,甲霜灵抗性、中抗、敏感菌株比例各占72.7%、9.1%、18.2%。其中吉林省敦化市采集的晚疫病菌甲霜灵监测结果均为高抗,而吉林省榆树市菌株均为敏感。3、对4省118株马铃薯晚疫病菌进行了生理小种测试,共发现了42个生理小种,平均含有8.73个毒力基因,其中共发现了35个能克服所有已知的R1—R11等11个抗病基因的“超级毒力小种”。表明我国晚疫病菌毒力基因组成日趋复杂。4、对晚疫病菌自育群体mtDNA单倍型,SSR基因型进行了测定,被测菌株mtDNA单倍型均为Ia,利用6对SSR引物进行了自育群体SSR基因型分析,所测自育群体基因型结构单一。5、采用水悬浮液萌发法,共获得了16株不同交配型的后代菌株,其中包括13株A1交配型菌株,2株A2交配型菌株和1株自育菌株。6、通过RAPD引物筛选法,对200个RAPD引物进行与交配型分子探针连锁的引物筛选,并获得了两个鉴定准确率较高的可用于致病疫霉交配型检测的RAPD引物标记。
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