诱导子对喜树细菌中喜树碱含量及色氨酸脱羧酶活性的影响

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水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(MeJa)及乙烯利(Ethrel)等诱导子在植物抗逆性方面的作用越来越受到科学工作者的关注,它们可以作为细胞信使激活特定的防御基因的表达,从而诱导与植物抗逆相关的次生代谢产物的合成。喜树中的喜树碱(Camptothecin,CPT)作为一种次生代谢产物,可以对多种环境胁迫产生应答。因此,本试验研究了伤害及诱导子——SA、MeJa、Ethrel对喜树幼苗中喜树碱含量的诱导效应、诱导周期以及诱导物的适宜浓度,探讨诱导子对喜树碱合成的调控机制,以期为增加喜树碱产量提供有效途径。另外,通过研究诱导子与UV-B辐射复合处理后喜树幼叶中喜树碱含量及其合成途径中的关键酶——色氨酸脱羧酶(TDC)活性的变化规律,探讨诱导子缓解UV-B辐射伤害的可能机制,取得的主要结果如下:1.机械伤害及喷施诱导子——SA、MeJa、Ethrel均能在一定程度上增强喜树碱的合成,其中水杨酸处理和机械伤害诱导效果最明显,比对照分别提高了47.7%和27.2%,伤害与诱导子复合处理对喜树碱含量的诱导无协同效应,相反,机械伤害可以抑制诱导子的诱导作用。2.诱导作用受诱导剂的使用浓度的影响,SA、MeJa和Ethrel的适宜浓度分别为50~100 mg·L-1、5~10 mg·L-1、5~10 mg·L-1。3.在喜树幼苗不同的发育时期,诱导作用不同。在子叶展开10d时用SA诱导可以使CPT含量提高106.3%,MeJa、Ethrel和伤害处理后含量也相应的增加了66.1%、70.2%和40.6%。在之后的发育时期进行诱导处理,诱导作用明显下降,这表明喜树次生代谢对诱导子的敏感期局限在生长发育的初始阶段。4.不同的诱导子均能在不同程度上影响喜树幼叶中TDC活性及CPT含量。UV-B辐射处理后TDC的活性较对照处理低,但后期幼叶中CPT含量却有升高趋势,表明植株对UV-B辐射的伤害已经产生了一定的防御反应。诱导子能迅速诱导幼叶中TDC活性显著升高,处理24h后,SA、MeJa、Ethrel诱导TDC活性分别升高了281%、514%、139%,随后,幼叶中CPT含量不断升高。5.SA、MeJa和Ethrel预处理均可以促进喜树次生代谢,从而缓解UV-B辐射对幼苗的伤害。SA、MeJa、Ethrel与UV-B辐射复合处理24h后,三组叶片中的TDC活性较UV-B辐射组的分别了提高48%、13%、153%,且在72h后仍保持较高活性。同时,复合处理大大提高了喜树幼叶中的CPT含量,增长幅度依次为32.8%、59.2%、75.3%。6.单一诱导子处理时,TDC活性在24h时达到高峰,而CPT含量的峰值出现较晚;UV-B辐射与乙烯利复合处理时,叶片中TDC活性与CPT含量均在24h出现峰值,而UV-B辐射与水杨酸、茉莉酸甲酯复合处理后,TDC活性与CPT含量之间的没有明显关系。
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