研究背景胰腺癌发病率和死亡率居全部恶性肿瘤的前10位,发病率与死亡率很接近,五年内生存率极低,小于5%。总体来看,发达国家胰腺癌发病率高于发展中国家。上海市胰腺癌发病率最高,为3.7/10万。胰腺癌病情凶险,死亡率接近于发病率,明确诊断后,患者的1年存活率为12%,5年存活率仅为1%-3%。目前,吉西他滨单药是治疗进展期胰腺癌的标准方案,患者中位生存期为5—7个月,1年生存率约20%。为了改善疗效,多种化疗药物和分子靶向药物被用来与吉西他滨联合治疗进展期胰腺癌,但在Ⅲ期临床试验中,只有吉西他滨联合厄洛替尼和吉西他滨联合卡培他滨较吉西他滨单药显示出微弱的优势。有研究以吉西他滨单药作对照,联合方案仅能提高患者无进展生存期及总反应率,并不能提高总生存期。目前尽管近年来胰腺癌的治疗取得一定进展,但仍然面临巨大挑战,即不同种族人群或个体存在着显著的治疗敏感性和不良反应差异。随着基因组学研究技术的不断发展,使得从个体基因组中分析和鉴别患者之间存在的疾病相关的个体差异,并利用这些差异来合理地指导临床治疗成为现实。基因组学研究从整体水平反映了疾病过程中不同阶段基因随时空变化表达的动态过程,与中医学以证候概括发病过程的认识方法有显著相似之处,中医学关于疾病“因人、因地、因时”的个体化辨证治疗模式符合基因多态性的特点。中医学认为胰腺癌是一种全身性的疾病,而西医学认为胰腺癌的发病是多因素、多步骤、内外因交互作用的过程,受多种基因、多个步骤的调控。近年来,随着基因组学研究技术的不断发展,有关中医证型与基因多态性的相关性研究成为中医基础理论研究的热点。相关前期动物实验显示证型对胰腺肿瘤生长存在一定的影响,由此我们推断证型的出现可能是不同机体微环境对肿瘤所作出一定的反应,进而我们通过研究肿瘤相关成纤维细胞、肿瘤相关巨噬细胞、趋化因子等与肿瘤微环境相关因素,结果进一步证实中医证型与肿瘤微环境存在一定的联系；通过临床资料回顾性分析中医证型与病人预后相关性,我们可以看出不同证型患者在药物有效期、总体生存期上存在一定的差异,湿热证型病人具有生存优势、预后良好。microRNA是一类长度约为21-13个核苷酸大小的非编码单链小RNA分子,越来越多的研究证明miRNA在细胞增殖、分化凋亡、压力抵抗等多种生理病理过程中有重要作用。已有多项研究证实miRNA在肿瘤中发挥着类似于癌基因与抑癌基因的作用,其通过影响重要的肿瘤相关基因的表达,从而对肿瘤发生、发展、转移及恶性程度等性状进行调控。胰腺癌发生表现于外是不同的临床症状、体征,而在体内则反映为不同生理病理改变及多种相关基因的变异。临床证候相同的患者可能存在较为一致的病理改变及相同的基因变异。因此,中医证型可能与miRNA存在一定的关联,探求中医证型与miRNA之间的相关性,对中医理论本质的研究具有一定的意义。研究目的1.回顾性分析胰腺癌患者化疗疗效、总体生存期与中医证型的相关性；2.探讨胰腺癌患者唾液中miRNA的表达水平与中医证型的相关性。研究方法1.回顾性分析复旦大学附属肿瘤医院2007年—2012年间的确诊为胰腺癌病人的临床资料195例,所有患者未经手术治疗且至少接受2个周期的吉西他滨化疗,通过证型量表采集病人证型相关信息。使用SPSS17.0统计分析胰腺癌病人的无进展生存期(PFS)、总体生存期(OS)与中医证型的相关性；2.收集胰腺癌患者的唾液标本,通过量表确定证型后,采用实时荧光定量PCR法检测胰腺癌患者唾液中miR-21、miR-181a、miR-222、miR-210的相对表达量,以miR-16为内参,采用2-△△CT分析方法对四种与胰腺癌相关miRNA的表达量进行相对定量,以探索胰腺癌中医证型与miRNA差异表达之间的相关性。研究结果1.符合入组条件的病人资料195例,总体生存期(OS)在四组间具有一定的差异(P=0.003),而无进展生存期(PFS)在组间则无明显差异(P=0.063)；湿热组病人的总体生存期分别为201天,95%可信区间为171--231天,由此可推断湿热组在病人预后生存相对其他三组具有一定的优势。2.miR-21表达水平在四组组间存在差异(F=19.911,P=0.003),湿热组miR-21表达水平低于脾虚组(P=0.001)和无证组(P=0.000);miR181a表达水平在四组组间存在差异(F=20.103,P=0.024),在湿热组中表达水平低于脾虚组(P=0.036)和无证组(P=0.011)。而miR-222、miR-210在四组样本中均未扩增出。研究结论1.化疗前的胰腺癌患者,中医证型能在一定的程度上提示胰腺癌的预后,湿热证患者预后最好,脾虚证患者次之,血瘀证患者预后最差。2. miR-21、miR-181a在湿热组表达水平最低,这提示唾液中游离的miRNA在不同中医证型存在一定表达水平的差异,由此我们推断胰腺癌患者唾液中miRNA表达差异结合中医证型的判断可能是胰腺癌预后的指标之一。