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研究背景:下肢缺血再灌注损伤的治疗一直都是血管外科领域具有挑战性的难题,一旦处理不好,会造成组织坏死,截肢,甚至还会使机体其它重要脏器受到伤害,危急病人的生命。研究表明,下肢缺血再灌注损伤所导致种种后果均与活性氧(ROS)的异常爆发有关,如何防止ROS的异常爆发成为了治疗下肢缺血再灌注损伤的关键。3-硝基-N-甲基-水杨酰胺简称3-NNMS,是一种线粒体半抑制剂,该药物可以减缓线粒体呼吸链上的电子流动速度,从根本上抑制了线粒体源ROS的产生。研究目的:本研究验证3-硝基-N-甲基水杨酰(3-NNMS)在下肢缺血再灌注损伤中的治疗效果,为将来血管外科的相关课题研究提供科学支持。研究方法:将20只八周龄雄性SD大鼠,随机分成4组,每组5只,采用结扎束缚环在SD大鼠右侧大腿根部进行结扎,缺血过程中采用激光多普勒血流监测系统对SD大鼠右肢进行血流监测,分别进行1小时,2小时,3小时,4小时45分钟的缺血,探索出最佳的缺血条件。确定最佳缺血时间为4小时45分钟后,将50只八周龄雄性SD大鼠,随机分为5组,1)空白对照组(Con):不进行缺血再灌注干预,仅注射PBS溶液,2)0μg/ml组:缺血再灌注+10%DMSO注射液,3)25μg/ml:缺血再灌注+25μg/ml的3-NNMS注射液,4)125μg/ml:缺血再灌注+125μg/ml的3-NNMS注射液,5)I/R+PBS组:缺血再灌注+PBS注射液。再灌注时间均为2个小时,干预结束后将每一只SD大鼠右下肢股直肌组织剥离,提取股直肌线粒体进行线粒体力能指标测试,通过分析股直肌损伤标志(CK-MM,LDH,MPO)、炎症因子(NF-κb,TNF-ɑ,IL-1β,COX-2)、MDA等指标以及HE染色,评价股直肌的功能及损伤程度。研究结果:经过4小时45分钟的缺血,再灌注2小时后,与空白对照组相比,缺血再灌注使股直肌氧化应激水平以及炎症损伤水平均显著性增高,线粒体功能遭到破坏。但加入3-NNMS后,浓度为125μg/ml的3-NNMS组与0μg/ml组相比,能够显著性提高线粒体RCR的水平(3.16±0.22 vs 2.03±0.51)。氧化应激测试结果显示,加入3-NNMS后,与0μg/ml组和I/R+PBS相比,股直肌组织中的的ROS水平和MDA水平显著性降低。抗氧化酶活力测试实验显示,加入3-NNMS后,可以使损伤股直肌组织中的抗氧化酶SOD活力显著性增高,125μg/ml的3-NNMS可以显著性提高损伤股直肌组织中的GSH-PX的活力水平。损伤标志物测试结果显示,3-NNMS可以显著性降低股直肌组织中的CK-MM,LDH水平。炎症因子水平测试结果显示,3-NNMS可以使股直肌组织中的TNF-ɑ水平显著性降低,而浓度为125μg/ml的3-NNMS可显著降低股直肌组织中的的NF-κb,IL-1β以及COX-2水平。研究结论:从氧化应激、抗氧化酶活力、炎症因子与损伤标志物以及线粒体相关指标的结果进行分析,结果证明3-NNMS可以降低损伤股直肌组织氧化应激水平,缓解了肌肉组织的炎症反映与损伤情况,并改善了线粒体RCR水平。此外,从作用效果上看,125μg/ml的3-NNMS略好于25μg/ml的3-NNMS。