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促性腺激素受体(Gonadotropin Receptors)是一种G蛋白偶联受体,在哺乳动物中包括两种类型的GTH受体(GTHR)即促卵泡素受体(Follicle-Stimulating Hormone Receptor,FSHR)和促黄体生成素受体(Luteinizing Hormone Receptor,LHR)[17-21]。在鱼类中,存在两种类型的促性腺激素受体GTHRⅠ和GTHRⅡ,通过对两种GTHRⅠ和GTHRⅡ的化学结构和生物活性分析显示GTHR一一对应着哺乳动物中的FSHR和LHR。促性腺激素必须与其受体特异性结合才能行使其相应的生物学功能,通过对GTHR的研究有利于我们进一步了解GTH在鱼类生殖周期调控中的生物学功能。本研究以草鱼(Grass carp,Ctenopharyngodon idella)为实验材料,获得的主要结果如下:
1.提取了草鱼的性腺组织的总RNA,根据已知开放阅读框设计合成草鱼促性腺激素受体基因(FSHR和LHR)的特异性引物,利用3RACE技术扩增了3端cDNA序列390bp。
2.通过RT-PCR技术检测LHR和FSHR在成体草鱼不同组织的表达:LHR在草鱼卵巢、精巢、肾脏、肠组织内有表达,而FSHR在草鱼卵巢、精巢、肾脏、肝脏组织内有表达。
3.Real-time PCR技术对促性腺激素受体在成体草鱼不同组织内的表达定量分析结果显示:在性腺中的表达量远高于其他组织。
4.Real-time PCR对不同发育时期草鱼的卵巢的表达定量分析结果显示:FSHR和LHR分析表明了在未成熟卵巢中他们的表达量都比较低,随着卵母细胞进入卵黄生成期,LHR和FSHR的表达水平逐渐增加,当卵母细胞达到充分成熟时期FSHR和LHR的表达量明显升高。上述研究还表明了LHR在草鱼卵巢的表达量比FSHR要低。
5.通过免疫组化分析FSHR和LHR蛋白在卵巢组织的定位:研究结果表明,LHR在卵巢细胞的卵母细胞和颗粒细胞中表达,FSHR仅在卵巢细胞的卵母细胞中表达。
该研究表明,FSHR和LHR在草鱼卵巢发育的不同时期都扮演着非常重要的角色。为进一步探讨GTHR在鱼类生殖周期中的生理功能奠定了基础。