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目的研究去甲斑蝥素(NCTD)与吴茱萸碱(EVO)联合用药对肝癌HepG2细胞增殖、周期凋亡的体外研究,以期为二者联合治疗肝癌提供理论依据。方法采用MTT方法检测去甲斑蝥素、吴茱萸碱及二者联合用药对肝癌HepG2细胞株的增殖影响;运用FCM技术检测两药联合诱导后对肝癌HepG2细胞株周期、凋亡和活性氧的影响;采用western blotting技术检测两药联合作用于肝癌HepG2细胞后Bcl-2和Bax蛋白的表达变化。实验结果1、不同浓度梯度的NCTD,EVO作用于HepG2细胞后,细胞的生长情况受到不同程度的抑制,这种抑制作用与药物浓度和作用时间呈依赖关系,NCTD,EVO对HepG2细胞作用24h,48h,72h的IC50值分别为177.6,102.1,76.3μmol/L和129.9,20.9,9.3μmol/L;2、NCTD与EVO联合处理HepG2细胞时,EVO能明显的增强NCTD对癌细胞的抑制作用, CI均<1,两者联合有协同效应,两药联合作用HepG2细胞48h的IC50值为NCTD(38.1μmol/L)+EVO(7.6μmol/L);3、与对照组及单独用药组比较,10μmol/L NCTD和2μmol/L EVO联合用药作用48h后,细胞周期阻滞在G2/M期的比例增加,G2/M期比例由EVO(36.13±1.63)%,NCTD(10.67±0.89)%上升至联合用药(73.42±1.92)%(P<0.05);4、40μmol/L NCTD和8μmol/L EVO联合诱导肝癌HepG2细胞48h,细胞凋亡率增加,凋亡率从单独用药EVO(15.78±3.08)%,NTCD(11.47±1.60)%增加至联合用药组的(21.86±2.70)%,药物组与对照组相比P<0.05;5、与对照组比较,HepG2细胞经40μmol/L NCTD、8μmol/L EVO以及NCTD联合EVO处理48h后活性氧表达升高(P<0.05)。6、40μmol/L NCTD和8μmol/L EVO联合48h后Bax的蛋白表达水平均明显提高,Bcl-2的表达水平呈下降趋势,同时,两者联合用药可使蛋白表达变化更加的明显(P<0.05)结论1、去甲斑蝥素和吴茱萸碱能抑制肝癌HepG2细胞生长,促进凋亡,两药对肝癌HepG2细胞有协同抑制效应。2、 NCTD与EVO联合使用可通过下调Bax/Bcl-2比例启动细胞凋亡,使细胞周期阻滞在G2/M期,提高胞内ROS水平,抑制肿瘤细胞的生长。