该文根据肿瘤坏死因子(TNF)结构与功能研究的最新信息及一些肿瘤细胞上白细胞介素-6(IL-6)受体显著增高的事实,针对降低TNF的毒付作用,提高其生物学活性等目的,利用PCR技术,对人TNFα基因进行了改造.并通过DNA序列分析,确证了改造后TNF突变体的核苷酸序列;同时对天然TNF和IL-6成熟肽编码区cDNA的PCR产物的序列进行了分析确证.构建了三种原核表达质粒,即:①表达5′IL6-TNF△融合蛋白的pVBIL6-TNF△;②表达TNF突变体的pBVTNF△;③表达天然TNF的pBVTNF.使它们分别在大肠杆菌中进行了表达,并对影响其在大肠杆菌中表达效率的条件进行了优化.进而对它们在大肠杆菌中的表达产物进行了纯化.用三种重组蛋白的纯化产物,在不同肿瘤细胞株上对5′IL6-TNF△融合蛋白的细胞毒活性与TNF突变体和天然TNF进行了比较等初步研究.结果表明,5′IL6-TNF△融合蛋白,即具有较高的生物学活性,又具有对高表达IL-6受体的肿瘤细胞特异性地杀伤作用.此融合蛋白,很有可能成为优于天然TNF的新型抗癌药物,值得进一步深入研究.