辣椒NAC cDNA的分离及其载体构建与遗传转化

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辣椒(Capsicum annuum)是病害发生较容易成灾的茄科作物,其功能基因组学研究是发现和应用重要抗逆基因开展辣椒遗传改良的重要基础。本研究从辣椒cDNA文库中分离获得可能参与辣椒适应逆境的候选基因的全长cDNA,分别构建其表达载体,并将其转入到烟草中,获得转基因植株。主要试验结果如下:1)NAC候选基因的cDNA的分离及其结构分析:本研究采用基于PCR技术的96孔板cDNA文库筛选的方法,获得了两个NAC基因全长cDNA,命名为CaNAC1和CaNAC2。经生物信息学分析发现,这两个基因都含有一个保守的NAC功能域,属于α-NAC分子伴侣家族的成员。2)载体构建及烟草遗传转化:通过Gateway载体构建技术构建了该基因的植物干扰表达载体和植物超表达载体,用农杆菌介导的方法转化烟草,CaNAC1获得50个T0代烟草超表达株系,CaNAC2获得了30个T0代烟草超表达株系。以上的研究为进一步分析CaNAC1和CaNAC2的功能奠定基础。
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