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抗生素在医疗业、畜牧业和养殖业中的长期滥用,导致抗生素抗性基因大量产生,对人类和动物的健康造成很大威胁。抗生素抗性基因作为一种新型污染物,在我国尚未得到足够重视,其产生、富集、传播规律等方面的研究才刚刚起步。鉴于此,本研究从抗生素抗性基因污染可能较严重的深圳市光明污水处理厂和木墩河采集水样,利用传统微生物学、PCR、定量PCR、克隆与序列分析等分子生物学方法,研究与人类关系密切的LFE的动态变化和耐药性情况、抗生素抗性基因污染情况,并对抗性基因的传播机制做了初步研究。 通过分离培养乳糖发酵型肠杆菌(LFE),对不同环境中LFE的存在情况、动态变化和抗生素抗性情况的研究发现:(1)光明污水处理厂进水段和木墩河上游中LFE显示高比例的多药抗性现象,这说明城市污水和养殖废水已成为水环境中重要的抗生素抗性基因污染源;(2)光明污水处理厂污泥段中抗四环素LFE占总LFE菌株的80％,明显高于国外污水处理厂的一般水平。 对光明污水处理厂和木墩河中抗生素抗性基因污染情况进行研究后发现:(1)在深圳光明污水处理厂和木墩河中8种四环素抗性基因被定性检出,分别是:tetC、tetM、tetA、tetE、tetG、tetO、tetS和tetX,其中tetC、tetG、tetM、tetO和tetX的检出率为100%,其次为tetA、tetE和tetS均为40%;(2)光明污水处理厂各工段和木墩河中tetC和tetE在抗性LFE中的比例均明显高于无抗性LFE,适合作为LFE四环素抗性的指示基因;(3)在光明污水处理厂和木墩河中,tetC和tetG的含量明显高于其他四环素类抗性基因,tetG最高可达2.31×106copies/ng,说明这两种抗性基因的污染较严重,可将tetC和tetG作为水体环境中抗性基因污染指标长期监测;(4)木墩河中tetC和tetG的种类较为单一,其中tetG与沙门氏菌某类tetG抗性基因(AY963830.5)具有98%的同源性,tetC与HQ399580C34具有99%的同源性,DNA序列中只有极少数碱基发生变化。