烟草赤星病是烟草生长后期重要的叶部真菌性病害,是烟草生产中最具威胁的恶性病害之一。本试验在烟草成熟采摘期,从重庆武隆、巫山、奉节、彭水、黔江、石柱、酉阳等烟区随机采集具典型赤星病症状的烟草病叶标本,经分离、纯化并通过常规组织分离得到赤星病菌共27株。对所得菌株初步测定其致病力,并对不同致病力菌株进行培养性状的测定及对采自不同烟区不同致病力菌株进行RAPD分析。研究结果如下:1.在烟叶成熟采摘期,选取病斑为圆形或不规则圆形,外围有淡黄色晕圈,褐色,且产生明显的同心轮纹的赤星病叶标本。在实验室经分离纯化并通过常规组织分离得到赤星病菌株共27株,其中武隆7株,彭水2株,奉节2株,秀山2株,酉阳3株,石柱3株,黔江1株,巫山7株。在马铃薯葡萄糖培养基(PDA)上培养发现,不同菌株在菌落性状、菌落颜色以及气生菌丝高度等方面均存在一定的差异。2.试验表明利用离体叶片悬滴接种法可较好地测定烟草赤星病菌的致病力,可将烟草赤星病菌致病力区分为强、较强、中、弱4种类型。对27个菌株进行的致病力筛选试验结果表明,不同菌株对烟草品种K326的致病力差异显著,其中较强致病力菌株3株,中等致病力菌株20株,弱致病力菌株4株,分别占供试菌株的11.1%、74.1%、14.8%,未发现强致病力菌株和无致病力菌株。表明所分离得到的多数菌株致病力居中。此外,不同病原菌株对离体叶片的穿透生长能力的测定结果显示,赤星病菌对烟草叶片的穿透生长能力与致病力呈明显的正相关。3.对27个菌株致病力初步筛选试验结果表明,从不同烟区分离得到的烟草赤星菌株致病力是存在差异的,其中石柱的平均致病力最高,平均病情指数为62.0,而酉阳平均致病力最低,平均病情指数为28.6。在同一烟区的不同菌株之间也存在明显的致病力分化。4.不同致病力菌株的培养性状比较表明:在25℃下,各供试菌株在PDA培养基上培养7d,菌落直径均达到4cm以上,产孢量均达到10~5个/mL水平,但较强致病力菌株D7-1、J4-5-5的生长速度较慢,菌落直径分别为4.27cm、4.65cm,产孢量较少,分别为4.1×10~5个/mL、2.2×10~5个/mL;中等致病力菌株A1-1、H2-2-3的菌落生长直径分别为6.14cm、6.50cm,产孢量分别为5.5×10~5个/mL、6.0×10~5个/mL。在马铃薯葡萄糖液体(PD)培养基中各供试菌株菌丝增重量相差较大,致病力较强菌株D7-1、J4-5-5的菌丝增重多,菌丝干重分别为1.098g、0.886g,中等致病力菌株A1-1、H2-2-3的菌丝干重分别为0.835g、0.794g。说明致病力强的菌株,在25℃下PDA培养基上菌落扩展速度较慢,产孢量少,但在马铃薯葡萄糖液体培养基中菌丝增重多。然而,致病力弱的菌株,在25℃下PDA培养基上菌落扩展速度较快,产孢量多,但在马铃薯葡萄糖液体培养基中菌丝增重较少。对不同致病力菌株毒素毒性的测定试验结果表明,不同致病力菌株所产毒素对烟草幼苗和烟草叶片的作用均存在一定的差异。在相同条件下强致病力菌株的毒素能够使烟草K326幼苗枯萎死亡,弱致病力菌株只导致部分幼苗出现黄化、生长缓慢的现象。应用离体叶片针刺法的毒素测定结果表明,相同条件下致病力强的菌株的粗毒素作用烟叶3d后的病斑直径达到约2.5cm,而致病力弱的菌株所得粗毒素只产生约0.5cm的病斑。因此不同致病力菌株产生毒素的毒性是有差异的,烟草赤星病菌致病力与其毒素毒性呈正相关趋势。5.对采自不同烟区不同致病力的烟草赤星病菌进行随机多态性分析表明,不同致病力的菌株所扩增出来的条带都是多态带,可初步判定不同致病力菌株在遗传上是存在差异的。另外,通过所选菌株的来源地分析,来自不同烟区的菌株扩增出的条带均有一定的差异性,所以不同烟区的菌株之间可能存在遗传上的差异。初步认为重庆烟区烟草赤星病菌具有一定的遗传多样性。