【摘 要】
：
该研究旨在从两株生防菌中分别克隆几丁质酶和内切葡聚糖酶的编码基因,并进行测序.将所获得的基因同穿梭质粒连接,转化野生型植病生防芽孢杆菌菌株,通过平板拮抗实验和盆栽试
论文部分内容阅读
该研究旨在从两株生防菌中分别克隆几丁质酶和内切葡聚糖酶的编码基因,并进行测序.将所获得的基因同穿梭质粒连接,转化野生型植病生防芽孢杆菌菌株,通过平板拮抗实验和盆栽试验检测获得的转化子对病原菌的拮抗作用的大小.本实验室从泰安效区小麦根际及来自澳大利亚的小麦根际土样中,经分离筛选出两株芽孢杆菌,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Ap113和巨大芽孢杆菌(B.megaterium)Ap25,两个菌株对小麦纹枯病和全蚀病都有防治效果;利用几丁质培养基和羧甲基纤维素培养基对这两株菌进行酶活性检测,已证实这两株菌分别具有几丁质酶和内切葡聚糖酶活性.几丁质酶基因的克隆:根据GeneBank上已有的枯草芽孢杆菌几丁质酶基因的编码序列,设计一对简并引物,根据引物的Tm值和GC含量选择适宜的PCR条件进行PCR,PCR产物与pMD18-T载体连接,转化E.coliDH5α,蓝白斑筛选得到23株菌株,在几丁质平板上筛选阳性克隆子4株.质粒分析证明克隆子中含有重组质粒,外源插入片段大小为2.6kb左右,与PCR最初产物的大小一致.测序后在GeneBank上进行序列比较,该基因片段同编号为2634966的枯草芽孢杆菌全序列的2599451到2812870(功能未知)有85﹪的同源性,但同已发表的13种几丁质酶的基因(包括枯草芽孢杆菌几丁质酶基因)的同源性很低,只有30﹪.尽管同源性比较低,但酶活性检测发现该基因片段具有几丁质酶活性,认为此PCR片段含有几丁质酶编码基因的全序列或部分序列,此基因片段是一个新基因或基因片段.对小麦全蚀病和纹枯病的的盆栽试验结果表明工程菌株p25113-9的防病作用强于野生菌株,尤其是对小麦全蚀病的防治作用,其防治效果同野生菌株Ap113和Ap25相比,分别增长了22.54﹪和20﹪.对芽孢杆菌几丁质酶和内切葡聚糖酶编码基因的克隆及其转化实验表明植病生防芽孢杆菌的作用机制之一就晃产生几丁质酶和葡聚糖酶这两种抗菌物质,已证实这两种抗菌物质之间具有协同效应,这为今后的生防菌遗传改良提供了一个新途径.
其他文献
1 朋友称我的画为“文人画”，大约与我写作的身份有关。其实，文人画与文人的画是两码事。“文人画”是个特定的概念。这个称谓，最初是由明代的董其昌提出的，但可以追溯到汉代。它的精髓之处，是主张让中国画进入到一个诗、书、画、印相通交融的境界。画中有诗意，有笔墨，有性情，有思想。无论是王维的“以诗入画”，还是苏轼的“以书入画”，为的都是这个，殊途同归，与当时的民间工匠画和宫廷绘画泾渭分明。随着时代的发展
本文研究了溴甲烷、磷化氢、植物精油等熏蒸剂及其与二氧化碳之间相互配合对朱砂叶螨成螨和卵的熏蒸作用以及对玫瑰、康乃馨、菊花等鲜切花的影响，旨在筛选出对害虫、害螨有很好熏杀效果，而对鲜切花影响又最小的熏蒸组合，以期为在全球彻底淘汰溴甲烷之前，且在继续使用溴甲烷的过程中如何减少溴甲烷的使用量提供参考依据。主要研究内容和结果摘要如下： 1、熏蒸处理对朱砂叶螨成螨的熏蒸作用 1．1 溴甲烷、磷化
斑翅果蝇[Drosophila suzukii(Matsumura,1931)]是一种广食性果实害虫，已知寄主遍及18个科60多种水果。其危害是雌虫将卵产于成熟和即将成熟的樱桃、蓝莓、草莓、柿子等软皮果
在巴黎（十二首） 嗨，克里斯蒂娃（Hi， Julia Kristeva） 黑板。每天。嘴。 活着免了死的解脱。 是谁说过 “金属成长，灵魂成长，虚无成长。” 你还在呼吸…… 带着行李与决心 能指大海、能指天地、能指星群 我听见另一个人的声道快感 现在是女性细节时间 你那咳吐式语言——说： 人的身体是一个感性文本 上面竖起象征和主体动乱 “写作是一门艺术， 它扎根于恐怖
赵玉龙42岁,昨天还是一个朴朴实实农民的儿子,今天却是一位精明能干的百万富翁。从身无分文到腰缠万贯,只用一年的时间。赵玉龙的父母是地地道道的农民,身体又不好,他很早就
采用厌氧培养箱技术、MPN（最大或然数）和滚管计数法以及气相色谱技术，研究了湿地稻-鸭复合系统土壤中甲烷细菌的数量，有机磷杀虫剂甲胺磷和酰胺类除草剂乙草胺对该系统土壤中甲烷
大麦mlo基因是野生Mlo基因的隐性突变体，该突变可以引发大麦产生对白粉病菌产生高效持久的广谱抗性。与一般小种专化性抗病基因不同的是，mlo基因不会引起被侵染细胞的过敏性反
该论文将生物合理设计方法与平行液相组合合成有机结合起来,进行新农药的创制,以期发现新的先导化合物,同时对重氮化合物的氢取代反应、以及5-氨基-3-甲硫基-1H-吡唑的甲基化
目的比较单双极钩形钳与国产超能剪在完全腹腔镜下乙状结肠/直肠癌根治术中的临床应用效果。方法在完全腹腔镜下行乙状结肠癌/直肠癌根治术患者126例,其中采用单双极钩形钳进
番茄溃疡病(Bacterial canker of tomato)是番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)生产中最为严重的细菌病害之一,病原菌为密执安棒状杆菌密执安亚种(Clavibacter michiganens