脑肿瘤干细胞的分离培养、鉴定与移植致瘤实验研究

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  本文第一章旨在利用分离培养人类和其它哺乳动物神经干细胞的成熟方法,从26例人胶质瘤和7例人髓母细胞瘤中分离培养具有异常增殖能力的脑肿瘤干细胞;观察这两类肿瘤中BTSC的体外增殖特性和单克隆细胞团的形成过程,确定其占全部肿瘤细胞的比率;探讨长期保存BTSC的方法;并观察其增殖形成的单克隆细胞团的超微结构。   本文第二章利用撤除培养基中的生长因子并添加胎牛血清的方法,诱导BTSC贴壁分化,应用HE染色方法观察分化细胞的形态;利用免疫磁珠分选方法分离原代肿瘤细胞中的CD133阳性细胞,以观察CD133阳性和阴性肿瘤细胞在体外增殖和体内致瘤性的差异;最后,利用免疫组织化学方法检测移植瘤、患者肿瘤组织和星形细胞瘤肿瘤周边水肿组织中是否存在CD133阳性细胞。   研究结论为,人髓母细胞瘤和胶质瘤的肿瘤组织中存在一定比例具有异常增殖能力的BTSC;可以利用添加EGF和bFGF的无血清培养基和悬浮细胞培养方法成功分离培养BTSC;胶质瘤和髓母细胞瘤肿瘤组织、星形细胞瘤的肿瘤周边水肿组织和裸鼠移植瘤组织中均可检出CD133阳性BTSC。最后,BTSC存在于肿瘤组织中,是中枢神经系统肿瘤干细胞,它与NSC既有相似之处,又存在本质区别。
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