【摘 要】
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该文以玉米为材料对干旱胁迫诱导ABA积累的细胞信号传递进行了深入研究.药理学实验表明,许多重要的信号系统如Ca、CaM、IP/DG、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶等都不参与ABA积累的信
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该文以玉米为材料对干旱胁迫诱导ABA积累的细胞信号传递进行了深入研究.药理学实验表明,许多重要的信号系统如Ca<2+>、CaM、IP<,3>/DG、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶等都不参与ABA积累的信号传递,令人兴奋的是,干旱诱导的ABA积累可被还原剂及酪氨酸蛋白磷酸酶(protein tyrosine phosphatase,PTP)专一抑制剂阻断,进一步研究表明,玉米胚芽鞘细胞中具有非常高的酪氨酸蛋白磷酸酶活性,且该酪氨酸蛋白磷酸酶活性可被干旱胁迫激活,表明酪氨酸蛋白磷酸酶可能参与了细胞逆境信号传递.采用阴、阳离子交换柱、分子筛及各种电泳技术揭示出脱水玉米胚芽鞘中至少含有4种以上的酪氨酸蛋白磷酸酶组分,其中分子量为42 kD的蛋白组分不仅对酪氨酸蛋白磷酸酶专一抑制剂如PAO和NaVO<,2>敏感,而且对还原剂DTT高度敏感.鉴于ABA积累不仅可被酪氨酸蛋白磷酸酶专一抑制剂阻断而且可被还原阻断,该文对DTT敏感的42 kD蛋白组分进行了分子克隆.根据蛋白微测序结果设计简并引物,采用PCR技术从干旱胁迫的玉米细胞中克隆到1330bp cDNA序列,基因文库BLAST显示该序列编码完整的含有DsPTP催化域(HCx<,5>RA)的基因.酵母体外表达实验证明,该克隆的基因(暂命名为ZmRSPTP1)对PTP底物呈现非常高的活性并且对DTT高度敏感.
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