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目的： 从SD大鼠体内提取脂肪组织并分离培养大鼠脂肪基质干细胞（Adipose-derivedstromal cells,ADSCs），并通过条件诱导基培养及流式细胞仪检测鉴定其生物学特性；在体外构建构建血红素氧化酶1（Hemeoxygenase1,HO-1）和骨形态发生蛋白2（Bone Morphogenetic Protein2，BMP-2）共同高表达慢病毒载体，并转染大鼠脂肪基质干细胞，观察其增值、凋亡和成骨的影响。 方法： 1.从SD大鼠体内提取脂肪组织，使用胶原酶消化，对其进行离心后，获得大鼠ADSCs，接种于培养皿中培养并传代。在倒置显微镜下观察其形态特点，并通过流式细胞仪对其表面标记物进行鉴定，确定为ADSCs后使用条件诱导基进行培养，鉴定其成骨及成脂能力。 2.将购置的含有HO-1和BMP-2目的基因的pUC57载体及实验室提供的慢病毒表达载体pZsG进行相同位点的酶切并重组，通过转化大肠杆菌DH5α进行扩增，挑取阳性克隆后进行菌落PCR鉴定，结果为阳性后提取质粒，并在293T细胞中包病毒，收取毒液后转染大鼠ADSCs。通过western blot实验鉴定转染后的大鼠ADSCs内是否有HO-1和BMP-2目的基因的表达。3.联合前期实验结果将细胞分为四组：ADSCs转导HO-1组、ADSCs转导BMP-2组、ADSCs转导双基因组和ADSCs未转导组。采用MTT实验和克隆形成实验比较各组的增值能力；通过流式细胞仪分析比较各组凋亡率；通过成骨培养基培养后镜下观察并常用Image J定量分析比较各组成骨分化能力。 结果： 1.成功体外分离及培养大鼠ADSCs，在倒置显微镜下可见其为梭形或多角形细胞，并呈集落样生长，通过条件诱导基的培养，大鼠ADSCs具有成骨和成脂分化能力，流式细胞仪鉴定结果CD29、CD44、CD90为阳性表达，具有干细胞特性，而CD45和CD31为阴性表达，排除造血干细胞混杂。成功构建含有HO-1和BMP-2的pZsG-HO-1-IRES-BMP-2高表达载体，成功转染大鼠ADSCs，通过western blot实验鉴定转染后的大鼠ADSCs内有HO-1和BMP-2目的基因的表达。 2.转染后的大鼠ADSCs通过MTT实验和克隆形成实验鉴定发现在增值率方面双基因组增值率低于HO-1组（p<0.05）；通过流式细胞分析在凋亡率方面双基因组增值率高于HO-1组（p<0.05）；在成骨分化方面双基因组增值率低于BMP-2组（p<0.05）。 结论： 1.通过体外分离，胶原酶消化，密度梯度离心联合贴壁方法可成功培养生长稳定、增值能力强的大鼠ADSCs，通过条件诱导基的培养及流式细胞鉴定证明其具有成脂及成骨能力，并具有干细胞特性。 2.成功构建含有HO-1和BMP-2的pZsG-HO-1-IRES-BMP-2高表达载体，成功转染大鼠ADSCs。 3.BMP-2与HO-1联合基因修饰的ADSCs细胞增殖能力较单HO-1基因修饰的ADSCs增殖能力弱。 4.BMP-2与HO-1联合基因修饰的ADSCs细胞凋亡率较单HO-1基因修饰的ADSCs凋亡率高。 5.BMP-2与HO-1联合基因修饰的ADSCs可向成骨细胞分化，但较单BMP-2基因修饰的ADSCs成骨分化能力弱。