有机磷农药由于其高药效性、广谱性、半衰期短等优点，广泛应用于农业、工业、医药等领域，取得了巨大的经济效益，但是不合理的应用却产生了严重的环境和食品污染等问题。传统的有机磷农药残留检测方法主要是色谱法，但是这些方法前处理步骤复杂，费事费力，设备昂贵，需要专业人员操作，难以满足现场快速检测的实际需要;相对而言，免疫分析法选择性高，无需或很少样品前处理，在现场快速检测和筛查中具有明显优势，处于检测技术的前沿。　　本课题根据小分子半抗原的设计原则，合成了有机磷农药通用半抗原。将其分别与不同的载体蛋白质牛血清蛋白、蓝蛋白和卵清蛋白(BSA，CCH，OVA)进行偶联，制备了具有免疫原性的人工抗原。用免疫原免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体，从而建立了有机磷农药多残留ELISA方法。所建立的方法为有机磷农药的快速多残留检测提供了技术手段，具有一定的使用价值和推广应用前景。　　本论文研究内容如下:　　(1)根据结构特征，首先合成了有机磷农药通用半抗原二乙基膦酸乙酸，采用红外光谱和核磁共振的方法对半抗原的结构进行确证。然后采用活酯法将半抗原分别与牛血清蛋白、蓝蛋白和卵清蛋白进行偶联制备出包被原和免疫原，并利用紫外光谱和红外光谱法对它们进行了表征。所得人工抗原偶联比分别为:8.3∶1、9.5∶1和10.1∶1。　　(2)用合成的免疫原（Hapten-BSA和Hapten-CCH）分别免疫两只新西兰大白兔后获得多克隆抗体，用间接ELISA方法测定得到的抗体效价，分别为51200，25600，51200，102400。采用辛酸-硫酸铵沉淀法对抗血清进行分离纯化，用SDS-PAGE凝胶电泳实验进行表征。通过ELISA方阵滴定确定了最适包被浓度为2μg/mL，抗体工作浓度为3200倍。　　(3)通过对包被缓冲液、有机溶剂、离子强度和PH值等因素的筛选试验比较，优化了酶联免疫分析的方法和条件。优化后结果显示:采用0.05mol/L pH9.6的CBS溶液做为包被液;最佳封闭试剂为1.0％的OVA的PBS溶液;用含有5％甲醇的PBS缓冲溶液稀释有机磷农药;将0.1mol/L pH7.5左右的PBS缓冲液做为反应介质。在最优条件下建立半抗原的间接竞争ELISA标准曲线。得到线性回归方程为I=0.1288Lg C+0.5854，相关系数R2=0.9770，线性范围在0.001～100μg/mL之间，抑制中浓度(IC50)为0.2172μg/mL，最低检测限(IC10)为0.1710ng/mL。　　(4)考察了8种有机磷农药与抗血清的亲和性，结果表明，与半抗原结构高度相似的对氧磷与抗体的亲和性最好;毒死蜱、氧化乐果和二嗪农与抗体的亲和性次之，而对辛硫磷的亲和性较弱，对其他有机磷农药（三唑磷、马拉硫磷、乐果）无识别作用。