三色堇与角堇花色、花斑遗传规律及组织培养的研究

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本试验通过观测F1代、F2代及BC1代的表型,对三色堇自交系间杂交、三色堇与角堇间杂交的花色和花斑的遗传规律进行了研究;初步建立了三色堇快繁和再生体系,为将来应用基因工程创造雄性不育系提供技术平台。主要研究结果如下:1.采用色差计对花瓣进行花色三刺激值的测定,结果显示:11个三色堇自交系和1个角堇自交系的花色分布较宽,包括黄色系、紫色系、蓝紫色系、红色系和白色系5个色系。三色堇花斑的颜色分布较窄,主要分布在紫色系,亮度普遍比花色暗。2.三色堇不同自交系间F1代的花色多呈亲本之间连续变化的花色,少数为两亲本之一的花色、亲本之间的某一种花色及亲本之外的花色。F2代除两亲本花色一致的组合外,均发生分离。三色堇与角堇杂交的结果与三色堇自交系间杂交的表现相似。3.本试验通过三色堇不同花斑类型的自交系、1个角堇自交系配制形成的5-6个世代群体,发现三色堇与斑块对条纹显性,条纹对纯色显性,斑块与纯色杂交的后代有条纹和斑块均有。4.初步建立了三色堇的快繁体系。最佳的初代培养基为MS+2.0mg/L BA+0.1mg/L NAA,适宜的继代培养基为MS+1.0 mg/L BA+0.02 mg/L NAA,生根可采用1/2MS+0.1 mg/L IBA,增殖过程中有一定程度的玻璃化,生根效果不理想。5.初步建立了三色堇节间茎段、叶柄的直接器官再生的体系。本试验以基因型22-8为主要试验材料。添加不同浓度的BA和NAA组合,ZT和NAA组合的MS培养基不能诱导三色堇节间茎段、叶柄、叶片的直接再生。添加不同浓度的TDZ和NAA的MS培养基可诱导叶柄、节间茎段的直接再生。诱导节间茎段直接再生率最高的组合是MS+1.0mg/L TDZ+0.1mg/LNAA,诱导率为56.7%。叶柄再生率相对较低,最高仅为25%,每个外植体的平均芽数最多为2.7,培养基为MS+0.5 mg/LTDZ+0.1 mg/L NAA。AgNO3抑制节间茎段和叶柄三色堇的再生,随着AgNO3浓度增高,再生率和每个外植体的平均芽数不断降低。另外一个基因型(4×15)叶柄和节间茎段均可直接器官再生,再生率与每个外植体的平均芽数与22-8无显著差别。
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