【摘 要】
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目的:筛选出卷柏中具有辐射防护作用的活性部位,并从细胞凋亡和抗氧化方面初步探讨其发挥辐射防护作用的机理。 方法:1. 利用MTT法检测不同接种密度的正常淋巴母细胞AHH-1的O
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目的:筛选出卷柏中具有辐射防护作用的活性部位,并从细胞凋亡和抗氧化方面初步探讨其发挥辐射防护作用的机理。
方法:1. 利用MTT法检测不同接种密度的正常淋巴母细胞AHH-1的OD490值,以确定最佳的细胞接种密度,并利用这个接种密度观察AHH-1细胞对射线的敏感性,筛选出最佳的辐照剂量和检测时间。根据以上结果确定药物筛选条件,检测卷柏中各提取部位对辐照细胞OD490值的影响,初步筛选出卷柏中具有辐射防护作用的活性部位。2.通过小鼠存活率实验进一步验证卷柏中具有抗辐射作用的活性部位,直接进行下一步的实验。3.提前给小鼠灌胃卷柏活性部位溶液,观察其对接受6.0Gy60Coγ,射线照射小鼠的胸腺和脾脏指数、胸腺和脾脏细胞周期和细胞凋亡率的影响。4.提前给小鼠灌胃卷柏活性部位溶液,观察其对接受6.0Gy60Coγ射线照射小鼠胸腺组织和血清中MDA含量和SOD活力的影响,确定其是否能够通过提高机体的抗氧化能力来发挥抗辐射作用。
结果:1.通过实验我们发现,AHH-1细胞对60Coγ射线非常敏感,用它进行药物体外活性筛选的最佳接种密度为6×105/ml,最佳辐照剂量为6.0Gy,最佳检测时间点为照后24h和照后48h;体外实验的结果表明卷柏水部位能够明显提高辐照细胞的存活率。2.通过辐照小鼠的30d存活率实验发现,卷柏水部位能明显增加接受8.0Gy 60Coγ射线照射小鼠的30d存活率和死亡动物平均存活时间,故将其作为卷柏中具有辐射防护作用的活性部位。3.提前给小鼠灌胃卷柏水部位溶液,可提高接受6.0Gy 60Coγ射线照射小鼠的胸腺和脾脏指数,明显降低其胸腺和脾脏细胞的凋亡率,并可降低受照射小鼠胸腺、脾脏细胞的G0/G1期百分率,升高其G2/M和S期百分率。4.提前给小鼠灌胃卷柏水部位、卷柏多糖、水部位去多糖溶液,可促进接受6.0Gy的60Coγ射线照射的小鼠的胸腺和脾脏指数的恢复,明显降低其胸腺和血清中的MDA含量,提高其胸腺和血清中的SOD活力,以卷柏多糖效果最好。
结论:卷柏水部位具有较好的辐射防护作用,它可以通过抑制细胞凋亡和发挥抗氧化作用来发挥辐射防护作用。
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