过表达lncRNA H19对奶牛乳腺上皮细胞生物学特性和功能的影响及作用机制

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cai2008
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奶牛乳腺炎是由于机体代谢和生理状态改变、乳房损伤以及接触传染性或环境性病原微生物等引起的乳腺炎症反应,是奶牛最常见的疾病之一。乳腺上皮细胞作为乳腺组织最重要的功能单位,其在炎性状态下的炎性应答及功能维持,决定了奶牛乳腺炎的发生与发展过程。长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)H19作为最新的发现的非编码RNA,广泛的参与动物机体的生理和病理活动。已有报道发现H19对各种细胞类型的细胞增殖均有影响,并且我们在前期的研究中发现H19在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的乳腺上皮细胞炎性模型中表达量增加。然而,H19在牛乳腺上皮细胞的炎症反应和潜在功能中的作用尚不清楚。在本实验中研究了过表达H19对奶牛乳腺上皮细胞系(MAC-T)炎性应答以及功能维持中的作用。结果显示H19的稳定高表达能够显着地促进MAC-T细胞的增殖和β-酪蛋白分泌。此外,稳定过表达H19的MAC-T细胞中紧密连接相关蛋白的表达水平明显增高,并且抑制金黄色葡萄球菌粘附作用。此外,我们进一步证实H19可以增强LPS诱导的NF-κB通路活化,从而促进TNF-α、IL-6、CCL2、CCL5等炎性相关因子的表达。这些结果表明了H19在抑制乳房组织的细菌感染和正常功能恢复中起着重要作用。最后,我们使用荧光素酶基因报告实验来探究H19基因上游4.679-kb序列中LPS的特异性启动序列,结果在所检测序列区域内没有发现有效应的启动子序列,需要进一步的研究来确定LPS调节MAC-T细胞中H19表达的机制。
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