探讨miR-200b在舌鳞癌细胞中的表达和对增殖与侵袭的影响

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【目的】本研究旨在探讨miR-200b在人舌鳞癌组织和细胞中的表达与临床意义以及生物学意义。【方法】培养正常舌粘膜上皮细胞株(TEC)为对照组(A组),不同舌鳞癌细胞株SCC-9、SCC-2、TSCCa、Tca8113分为B、C、D、E组,作为实验组,运用实时荧光定量PCR检测不同舌鳞癌细胞株与正常舌粘膜上皮细胞株中miR-200b的表达。收集62例舌鳞癌组织与癌旁正常组织,其中癌旁正常组织作为对照组(A1组),舌鳞癌组织为实验组(B1组),运用实时荧光定量PCR检测62例舌鳞癌组织与癌旁正常组织中miR-200b的表达,并分析miR-200b的表达变化与舌鳞癌患者临床病理资料的相关性。运用转染技术将scramble、control-siRNA、miR-200b mimics、Bmi-1-siRNA分别转染于舌鳞癌Tca8113细胞分成A2、A3、B2、B3四组,其中scramble组(A2组)与miR-200b mimics组(B2组),control-siRNA组(A3组)与Bmi-1-siRNA组(B3组)分别配对,A2、A3为对照组,B2、B3为实验组。采用Western blot和qRT-PCR检测miR-200b对Bmi-1基因的蛋白和mRNA表达变化。采用MTT法检测miR-200b与Bmi-1-siRNA对舌鳞癌Tca8113细胞增殖的影响。采用Transwell侵袭实验检测miR-200b与Bmi-1-siRNA对舌鳞癌Tca8113细胞侵袭的影响。【结果】1.qRT-PCR结果显示,与A组比较,B、C、D、E组miR-200b的表达均降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与A1组比较,B1组miR-200b的表达亦降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,在62例舌鳞癌组织中,miR-200b的表达水平与患者的临床分期和淋巴结转移呈负相关。2.Western blot与qRT-PCR结果显示,与A2、A3组比较,B2、B3组均能明显下调舌鳞癌Tca8113细胞中Bmi-1的蛋白与mRNA表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.MTT结果显示,与A2、A3组比较,B2、B3组OD值均明显减小,差异均有统计学意义(P<0.05)。4.Transwell结果显示,与A2、A3组比较,B2、B3组穿过基质胶的Tca8113细胞数明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。【结论】1.miR-200b在舌鳞癌细胞与组织中的表达均下调,miR-200b在舌鳞癌中表达下调与患者的临床分期和淋巴结转移负相关。2.miR-200b可通过靶向Bmi-1抑制舌鳞癌细胞增殖与侵袭。
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