目的 既往认为中枢神经系统神经元一旦损伤不能再生,尤其是哺乳类动物脊髓内的神经元缺乏再生能力。然而,上世纪80年代始,有研究表明移植外周神经和胎髓能促进脊髓损伤轴突的再生。以后,诸多实验显示了脊髓损伤后可能会再生。而骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)因具有多向分化的潜能、在一定条件下可分化为神经元样细胞,且易于提取、分离等特点,已成为细胞替代治疗的新来源。 有报道,将大鼠MSCs移植到脊髓挫裂伤的大鼠体内,显示了明显的功能恢复。研究者直接地或将大鼠MSCs与神经球细胞共培养后,通过局部点注射的方式移植进大鼠损伤的脊髓内,发现实验组大鼠的后肢运动功能比对照组恢复明显,形态学检测显示移植的MSCs位于损伤区中心,且朝向损伤中心牵拉宿主组织,阻止脊髓空洞的形成。虽然诸多研究表明MSCs可部分修复损伤脊髓的解剖连接,但目前仍无充分结果说明MSCs能够恢复损伤脊髓的传导功能。为此,我们首先建立了大鼠脊髓半横断损伤模型,通过将MSCs移植到受损区,探讨MSCs在脊髓传导功能损伤修复中的作用,进一步探索MSCs替代治疗的可行性,为治疗中枢神经系统损伤提供理论依据。 方法 1、大鼠MSCs的分离培养和鉴定 1.1在无菌条件下取Wistar大鼠股骨和胫骨骨髓细胞做原代培养。 1.2根据细胞贴壁性能不同,筛选易贴壁但贴壁不牢的细胞进行传代培养。