复方中药对腹水综合征肉鸡肝组织纤维化的影响

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肉鸡腹水综合征(Ascites Syndrome,AS)是一种常见的代谢病,病因复杂,发病率高,预后较差。中药作为纯天然产物,具有低残留、低毒副作用等特点,研究证实能有效防治AS。研究表明,TGF-β1等促纤维化因子及TGF/Smad通路与肝组织病理变化密切相关。本试验旨在研究AS肉鸡肝组织胶原蛋白和肝纤维化相关因子及其通路的变化,和复方中药有效防治AS的相关机理。方法:采用多因素法(饮水中添加0.12%Na+,日粮中添加3%猪油和4%鱼粉)诱导腹水综合征模型。309羽7日龄罗斯肉鸡随机分为空白组、模型组(多因素法诱导模型)、L-Arg组(多因素诱导模型,日粮中再添加1%L-Arg)、中药组(分为高、中、低剂量组,多因素诱导模型,饮水中分别添加2、1、0.5 g/kg.d复方中药)。于15、25、35和45日龄每组随机取10羽鸡只,称重,剖杀,观察病理变化,取心脏、肺脏、肝脏、脾脏测定脏器指数,取部分肝组织观察病理学变化,ELISA法检测肝组织α-SMA、I型胶原、III型胶原、HIF-1α、TGF-β1、TβRI、CTGF蛋白含量,荧光定量PCR法检测肝组织 HIF-1α、TGF-β1、TβRI、CTGF、Smad2、Smad3、Smad7 mRNA相对表达量,。结果:1、试验发现,模型组肉鸡体态瘦小,精神状态差,腹部膨大有波动感,穿刺可见稻草黄色液体,剖检可见心包积液,右心肥大,质软壁薄,肝、肺充血肿大。各剂量中药组和L-Arg组肉鸡症状均有不同程度减轻。2、与空白组相比,各日龄模型组AS发病率、腹水心脏指数、心脏指数、肺脏指数和肝脏指数显著增加(P<0.01或P<0.05),体重和脾脏指数显著降低(P<0.01或P<0.05);与模型组相比,各日龄各剂量中药组和L-Arg组AS发病率、腹水心脏指数、心脏指数、肺脏指数和肝脏指数显著降低(P<0.01或P<0.05),体重和脾脏指数显著增加(P<0.01或P<0.05。3、与空白组相比,各日龄模型组肝组织α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、HIF-1α、TGF-β1、TβRI和CTGF蛋白水平显著增加(P<0.01或P<0.05);与模型组相比,各日龄各剂量中药组和L-Arg组肝组织α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、HIF-1α、TGF-β1、TβRI和CTGF蛋白水平显著降低(P<0.01或P<0.05)。4、与空白组相比,各日龄模型组肝组织HIF-1α、TGF-β1、TβRI、CTGF、Smad2和Smad3 mRNA相对表达量显著增加(P<0.01或P<0.05),Smad7 mRNA相对表达量显著降低(P<0.01或P<0.05);与模型组相比,各剂量中药组和L-Arg组肝组织HIF-1α、TGF-β1、TβRI、CTGF、Smad2 和 Smad3 mRNA 相对表达量显著降低(P<0.01 或P<0.05),Smad7 mRNA相对表达量显著增加(P<0.01或P<0.05)。结论:1、AS肉鸡AHI、心脏指数、肺脏指数、肝脏指数和肝组织α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、HIF-1α、TGF-β1、TβRI、CTGF 蛋白含量以及 HIF-1α、TGF-β1、TβRI、CTGF、Smad2和Smad3 mRNA相对表达量增加,体重、脾脏指数和Smad7 mRNA相对表达量降低,表明TGF/Smad信号通路通过调控促纤维化相关因子,促进肝组织发生纤维化,参与AS形成与发展。2、复方中药和L-精氨酸能下调AS肉鸡AHI、心脏指数、肺脏指数、肝脏指数和肝组织α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、HIF-1α、TGF-β1、TβRI和CTGF蛋白含量以及HIF-1α、TGF-β1、TβRI、CTGF、Smad2和Smad3mRNA相对表达量,上调体重、脾脏指数和Smad7mRNA相对表达量,表明复方中药和L-精氨酸能通过TGF/Smad信号通路通过调控促纤维化相关因子,抑制肝组织发生纤维化,有效防治AS。
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