bFGF复合物对大鼠胫骨骨折模型中VEGF及Ⅰ型胶原蛋白表达的影响

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目的:观察大鼠胫骨骨折愈合过程骨痂组织中Ⅰ型胶原和血管内皮生长因子的表述,对bFGF与FS复合物的促骨折愈合作用进行深入的研究分析,为今后的骨折的临床治疗方法提供一定的经验积累。方法:遴选45只健康雄性3月龄SD大鼠,随机分为bFGF+FS组15只、FS组15只、NS组15只,3组大鼠分别行左胫骨上段横形骨折,建立大鼠胫骨骨折模型。3组实验动物均用注射器从骨折周围正常皮肤穿刺到骨折端,bFGF+FS组动物注入bFGF+纤维蛋白凝胶(Fibrin sealant, FS)复合物1 m1,至分批处死;FS组及NS组动物骨折端分别注入FS及生理盐水各1ml,然后分三批次处死三组动物:三组动物在手术后需要用小夹板将骨折的肢体进行固定,时间大致在2周左右,然后在造模后的第二、四、六周分三批次将3月龄SD大鼠处死,并取其身体做成标本。在每组中每次处死的SD大鼠是随机的,数量为5只,行X射线片观察骨折愈合情况,组织学染色光镜下观察骨痂内成骨细胞数量,免疫组化染色行Ⅰ型胶原及VEGF免疫组化检测。结果:1、X线片结果:骨折后同一时间点,X线片显示bFGF+FS组骨痂生成量最多,骨量高,骨折愈合程度明显优于FS组及NS组。2、组织学观察结果:苏木精-伊红(HE)染色光镜下观察显示,bFGF+FS组胶原排列紧密,成骨细胞数量多;FS组胶原排列较松散,成骨细胞数量较bFGF+FS组略少;NS组胶原排列松散,成骨细胞数量少。3、免疫组化结果:3.1Ⅰ型胶原蛋白免疫组化染色结果:从2,4,6周各观察周期来看,同一周期内bFGF+FS组及FS组Ⅰ型胶原蛋白染色图像灰度值较NS组低,表明bFGF+FS组及FS组骨痂组织中Ⅰ型胶原蛋白含量较NS组高,但随实验周期推移,各组Ⅰ型胶原蛋白染色图像灰度值均呈下降趋势。这说明在Ⅰ型胶原在同一周期之内但是因为分组不同从而使得灰度值也具有差异性(P<0.05),bFGF+FS组与FS组、bFGF+FS组与NS组之间有显著性差异(P<0.05),FS组与NS组之间无显著性差异((P>0.05)。3.2 VEGF免疫组化染色结果:bFGF+FS组VEGF图像的平均光密度值(OD值)总体较FS组及NS组高,且随观察周期推移呈上升趋势,第6周达到峰值;FS组及NS组OD值较bFGF+FS组低,虽然随观察周期推移也呈上升趋势,但是上升幅度较bFGF+FS组小。最后结果表明bFGF+FS组OD值高于FS、NS组,差异有显著性(P<0.05), FS、NS组之间OD值差异无显著性,无统计学意义(P>0.05)。结论:1. bFGF复合物较单纯FS在大鼠骨折愈合过程中可加强Ⅰ型胶原蛋白及VEGF的表达,对大鼠骨折愈合有促进作用。2. bFGF复合物对大鼠胫骨骨折修复的效果优于单纯FS。
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