翻白草调控线粒体自噬治疗溃疡性结肠炎的机制研究

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实验目的:通过观察溃疡性结肠炎模型大鼠的结肠组织中线粒体自噬相关蛋白NF-κB、p62以及Parkin的表达情况,以及透射电镜直接观察结肠组织线粒体自噬相关活动,探究彝药翻白草调控线粒体自噬治疗溃疡性结肠炎的疗效和可能的机制。实验方法:1.翻白草治疗UC模型大鼠的药效学评价造模方法为TNBS/乙醇改良复合法,连续给药翻白草醇提剂14d。绘制实验大鼠的DAI评分趋势图进行解读,观察和对比各组实验大鼠的结肠组织病理形态学变化,综合分析翻白草对UC模型大鼠的肠道粘膜修复作用以及对UC的治疗效果。2.翻白草对大鼠溃疡性结肠炎线粒体自噬相关机制研究以线粒体自噬相关途径NF-κB-p62-mitophagy以及PINK1/Parkin信号通路切入,利用Western Blot法和qRT-PCR方法检测检测结肠组织NF-κB、p62以及Parkin表达情况。以及通过透射电镜观察结肠组织线粒体超微结构。初步明确线粒体自噬在溃疡性结肠炎发生发展中的作用,并对翻白草通过调控线粒体自噬修复结肠粘膜破损的可能机制进行阐述。实验结果:1.通过对实验大鼠DAI评分趋势图以及各组大鼠结肠病理学形态进行对比分析,发现翻白草组和柳氮磺吡啶组在改善UC模型大鼠炎症情况以及修复UC模型大鼠受损肠道粘膜方面都有较好的效果。2.对qRT-PCR检测结果进行分析,发现与空白组相比,模型组大鼠结肠组织parkin、NF-κB、p62表达差异有统计学意义(P<0.05),翻白草连续灌胃14天后,与模型组相比,大鼠结肠组织parkin、NF-κB、p62的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。3.透射电镜结果显示,翻白草组的线粒体肿胀且线粒体与溶酶体融合的现象比较明显,并且能发现较多溶酶体聚集在线粒体周围。说明翻白草组UC模型大鼠发生了比较明显的线粒体自噬的情况。结论:1.翻白草对于TNBS/乙醇改良复合法复制模型大鼠的溃疡性结肠炎有效。2.翻白草可以通过调控UC模型大鼠结肠粘膜线粒体自噬相关蛋白的表达来发挥对UC的治疗作用。
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