论文部分内容阅读
目的:探讨miR-127、miR-155和miR-200a在EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染相关的儿童散发性伯基特淋巴瘤(Burkitt’s lymphoma,BL)中的表达及意义。方法:1、收集2005~2012年江西省儿童医院病理科外科手术切除的40例BL标本及15例慢性扁桃体炎标本。分析其临床病理特征及随访资料,制备组织芯片,运用原位杂交技术对标本进行EBV基因检测;根据EBV基因检测结果将BL分为EBV感染阴性组、EBV感染阳性组和正常对照组。2、运用qRT-PCR法,对已分组的40例BL和15例慢性扁桃体炎石蜡标本进行miR-127、 miR-155和miR-200a表达的检测。3、培养BL细胞株Raji(EBV阳性)和Ramos(EBV阴性),运用qRT-PCR法对细胞株中miR-127、 miR-155和miR-200a的表达进行检测。4、运用荧光原位杂交(fluorescence in-situ hybridization,FISH)技术检测40例BL石蜡组织及BL细胞株中c-myc基因的异常情况。5、使用13.0统计软件包对实验数据进行分析,计量资料采用“平均值±标准差”,计数资料采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。结果:1、40例BL病例中16例EBER阳性(40%),其中2例(12.5%)位于肠系膜淋巴结、4例(25%)位于回盲部肠组织、10例(62.5%)位于肠系膜+回盲部;24例EBER阴性(60%),其中2例(8.33%)位于肠系膜淋巴结、6例(25%)位于回盲部肠组织、16例(66.67%)位于肠系膜+回盲部。15例扁桃体组织EBER均为阴性(100%)2、40例BL中38例c-myc基因断裂阳性(95%),其中EBER阴性23例(60.53%),EBER阳性15例(39.47%);2例c-myc基因信号正常(5%),EBER阳性和EBER阴性各1例(各50%)。Raji细胞株c-myc基因断裂阳性,Ramos细胞株基因信号正常。3、与EBER阴性的BL病例及扁桃体组织比较,EBER阳性的BL病例miR-127表达上调(P﹤0.05),差异有统计学意义。Raji细胞株和Ramos细胞株相比,Raji细胞株中miR-127表达上调(P﹤0.05)。与EBER阴性的BL病例比较,miR-155在EBER阳性的BL病例中表达上调,但无显著差异性(P﹥0.05),EBER阳性BL的病例与扁桃体组织相比表达上调(P﹤0.05),差异有统计学意义。Raji和Ramos比较,在Raji细胞株中miR-155的表达上调(P﹤0.05)。miR-200a的表达在EBV阳性的BL相比EBV阴性的BL(0.504±1.214)和扁桃体组织表达显著降低(P﹤0.05),Raji和Ramos比较miR-200a表达显著降低(P﹤0.05)。miR-127、miR-155和miR-200a的表达与c-myc基因比较均无统计学意义(P﹥0.05)结论:(1)miR-127、miR-155和miR-200a在EBV不同感染状态的儿童散发性BL中表达存在差异。(2)miR-127、miR-155的高表达及miR-200a的低表达与儿童散发性BL的发病机制及EBV感染密切相关,可能起着类似癌基因/抑癌基因的作用。