论文部分内容阅读
本文以花梨木的可再生资源——叶为原料,首次分离得到染料木素和鹰嘴豆芽素A两种异黄酮类物质,并在建立同时分析和检测花梨木叶中染料木素和鹰嘴豆芽素A的RP-HPLC法的基础上,采用BBD(Box-Behnken design)研究了花梨木叶中染料木素和鹰嘴豆芽素A的负压空化提取工艺。结论如下：1.花梨木叶主要含有四种含量较高的物质,经过提取、萃取、树脂富集、柱层析及重结晶等分离纯化过程,并结合对照品HPLC分析、二级质谱及紫外吸收光谱分析鉴定,首次从花梨木叶中分离得到染料木素和鹰嘴豆芽素A两种异黄酮类成分,为染料木素和鹰嘴豆芽素A提供了新资源。2.建立了RP-HPLC法用于花梨木叶中染料木素和鹰嘴豆芽素A的同时分析和检测。色谱分离条件：Jasco高效液相色谱仪；HIQ Sil C18V(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱；检测波长为260nm；检测温度为30℃；流动相为(A)乙腈-(B)水(v/v)体系,洗脱梯度为0-5 min 40%-60%A,5-15 min 60%A,15-16 min 60%A-40%A,16-21 min 40%A;流速为1 mL/min;进样量10μL。在浓度线性范围内,染料木素和鹰嘴豆芽素A均显示出良好的线性关系(R2>0.9964),重现性、精密度及稳定性试验中,相对标准偏差均(R.S.D.)均<3.0%。花梨木叶子中染料木素和鹰嘴豆芽素A含量可达0.976 mg/g DW和1.699mg/g DW。3.确定了染料木素和鹰嘴豆芽素A负压空化提取工艺。得到最佳工艺参数为：提取时间：20 min乙醇浓度：66%液固比：28:1 (mL/g)负压：-0.055 MPa提取次数：3次在上述优化的工艺条件下,染料木素和鹰嘴豆芽素A的得率分别可达到0.933 mg/gDW和1.583 mg/g DW,提取率分别为95.59%和93.17%,R.S.D.分别为1.34%和1.04%。