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由禾谷镰刀菌引起的小麦赤霉病严重影响小麦的产量和品质,是小麦育种工作中亟待解决的难题。研究发现真菌侵染作物时细胞壁与作物直接接触,在致病过程中发挥重要作用。因此分离禾谷镰刀菌细胞壁上的相关抗原蛋白并以此制备特异性抗体,对小麦抗赤霉病育种工作的开展具有重要意义。本文探索了禾谷镰刀菌在不同培养时间、不同培养基中细胞壁蛋白的表达差异,比较了不同提取方法及染色方法的差异,主要实验结果如下:分别在48h、60h、84h、5d等不同培养时间,Czapek、Czapek/[Man]、PDB、PSB等不同培养基中培养禾谷镰刀菌,然后提取不同培养条件下的细胞壁蛋白,分析发现培养时间在60h左右细胞壁蛋白表达种类较多;在Czapek和Czapek/[Man]培养基中培养的细胞壁蛋白,要明显比来自PDB和PSB培养基的菌丝细胞壁蛋白种类多、表达量高;同时在培养过程中添加代谢物,可能会对一些细胞壁蛋白的表达产生上调或下调的影响;用细胞壁蛋白分级提取法和试剂盒提取法分别提取菌丝壁蛋白,比较发现试剂盒法提取的细胞壁蛋白含量较低、种类也不及分级提取法丰富,两种提取方法结合使用比单独使用任何一种方法得到的蛋白种类和含量都要多一些;通过四种不同的银染方法对禾谷镰刀菌细胞壁蛋白进行染色分析,发现固定液组成为80%乙醇和20%冰乙酸,敏化液组成为30%乙醇、0.5%戊二醛、0.02 M硫代硫酸钠及0.83M醋酸钠时,细胞壁蛋白的银染效果最好。随着分子生物学技术的发展,利用大肠杆菌表达系统获得大量科研或商业用途的蛋白质已成为最简捷廉价的生产方法。本实验利用大肠杆菌表达系统克隆、表达了4个禽流感病毒蛋白(M1、M2、NA、HA)及2个抗穗发芽相关蛋白(BASI,Vp1),并用透析袋电洗脱法对6个蛋白进行回收、纯化。SDS-PAGE及Western杂交结果表明,这6个蛋白均可在大肠杆菌细胞中正常表达;利用透析袋电洗脱法,回收了经SDS-PAGE电泳后凝胶上的目的蛋白。这些研究结果为实验室下一步研究工作的开展打下基础。