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血红蛋白(Hemoglobin,Hb)是血液中负责运载氧和二氧化碳的蛋白质,也正是它使血液呈红色。血红蛋白浓度指单位血液内所含血红蛋白数量,成年人血红蛋白浓度正常范围在110~160g/l,血红蛋白浓度值受许多生理因素影响,但一旦测定值与参考值差异超过20%,则通常是病理因素所致异常。血红蛋白浓度检测作为贫血及其他病理判定的指标,为满足当前"移动采血、运动员状态检测、病房快速检查"等众多应用场合对血红蛋白浓度快速检测的广泛需求,提出"便携式血红蛋白浓度快速测定仪"的研制。 目前国内外常用方法与技术各具特点,如:硫酸铜滴定法携带不便,且定量测量精度不高;目测比色法非常便利,但精度低;氰化高铁血红蛋白法精度高,是WHO推荐的参考方法,但其试剂剧毒处理复杂;近红外光谱法可用于多项生理参数的综合定性测量,但不易实现小型化,且当前对于人体的测试精度低;Hemocue采用的叠氮高铁血红蛋白法是一种测试精度高的替代氰化高铁血红蛋白法的原理,且可实现便携式设计。若基于叠氮高铁血红蛋白原理,且采用分光光度法的光学定量测量方法,进行便携式设计,是一种综合性能优异的设计方案。 首先明确了便携式血红蛋白浓度测定仪的设计目标;根据420nm到1000nm波段的叠氮高铁血红蛋白溶液吸收光谱曲线,选定了570nm为主波长,880nm为次波长,并给出了双波长法的血红蛋白浓度计算方法;基于上述原理及检测方法,提出了仪器的概念设计及基本工作流程,为仪器的设计奠定了坚实基础。 基于便携式结构设计理念,设计了一种集“采血、容血、反应区、反应物的光学待测区”于一体的“手持式微片”耗材结构,微片中含10ul的固定容血腔,用于虹吸血样,空腔内固化试剂与血样进行化学反应,容血腔中部设计有一“光眼”用以后续分光光度测量;然后对试剂的配方进行了研究,确定了试剂中亚硝酸钠、叠氮钠、去氧胆酸钠、抗凝剂的比例与配方工艺;根据全波段扫描拟合了试剂的标准曲线,并研究了吸光度随时间的变化规律及试剂的干燥工艺。 最后进行了血红蛋白浓度测定仪的样机设计,仪器的推送机构可实现微片的快速装载、准确定位及自动缓释入位;基于 MSP430F149进行了控制系统设计,基于单片机的 A/D输出信号实现发光强度的调制,从而实现快速校准,利用反馈机制实现了发光信号温度漂移的自动消除;设计的软件界面包括“设置”、“结果回看”、“自动测试”等三大功能。通过系统的实验研究表明:本血红蛋白浓度测定仪在常用范围内线性度好,检测结果与世界卫生组织推荐的氰化法相关系数高达0.9836,准确度超过96%。