复方中药制剂对仔猪免疫机能的影响及其机理研究

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在日粮中添加2种不同剂量的复方中药制剂,研究其对仔猪抗氧化酶活性、细胞免疫、体液免疫、肠黏膜免疫以及血清生长激素水平和胸腺及脾脏中生长激素受体(GHR)mRNA的表达量的影响,探索不同剂量复方中药制剂对仔猪免疫机能的作用及其机理。从9窝新生“杜长大”三元杂交仔猪中选择临床检查健康的90头为试验猪,并按体重和性别随机分成3组,每组30头仔猪。在14日龄时,组Ⅰ、组Ⅱ、组Ⅲ仔猪分别饲喂基础日粮、基础日粮+复方中药制剂1%、基础日粮+复方中药制剂2%。在14、24、45日龄,每天上午7:00~9:00对所有仔猪空腹称重、称量剩余的饲料量,记录阶段耗料量、每组腹泻头数。每组随机选取20头仔猪,于14、24、32和45日龄时,经前腔静脉采血,测定血清超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性、免疫球蛋白(IgG,IgA和IgM)水平、淋巴细胞转化率和白细胞吞噬率、白细胞介素-2(IL-2)含量和生长激素水平(GH)。3组仔猪均于45日龄时,各剖杀6只仔猪,在十二指肠近端、空肠近端1/4处、空肠远端1/4处和回肠中段用利剪取下近1cm的肠管4段,迅速放入备用的10%福尔马林固定液中,待做组织切片,测量小肠间淋巴细胞和杯状细胞数量。并分别采集胸腺和脾脏,采用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法,定量分析仔猪胸腺及脾脏中生长激素受体(GHR)mRNA的表达量。结果表明:(1)复方中药制剂显著提高仔猪生长性能与组Ⅰ比较,在45日龄,组Ⅱ和组Ⅲ仔猪个体重极显著或显著提高(P<0.01或P<0.05);在14~24日龄,组Ⅱ仔猪平均日增重显著提高(P<0.05);在24~45日龄,组Ⅱ和组Ⅲ仔猪平均日增重、平均日采食量和料重比极显著或显著提高(P<0.01或P<0.05);组Ⅱ、组Ⅲ仔猪腹泻指数均极显著降低(P<0.01)。与组Ⅲ比较,在45日龄时,组Ⅱ仔猪个体重显著提高(P<0.05);在14~45日龄,组Ⅱ仔猪平均日增重显著提高(P<0.05);在24~45日龄,组Ⅱ仔猪料重比显著提高(P<0.05)。(2)复方中药制剂显著提高仔猪血液抗氧化酶的活性在14和24日龄,3组仔猪血清SOD含量差异不显著(P>0.05);在32、45日龄,组Ⅱ和组Ⅲ仔猪血清中SOD含量极显著或显著高于组Ⅰ(P<0.01或P<0.05),而组Ⅱ和组Ⅲ之间差异不显著(P>0.05)。在14日龄,3组仔猪血清GSH-Px含量差异不显著(P>0.05)。在24日龄,组Ⅱ仔猪血清GSH-Px含量显著高于组Ⅰ和组Ⅲ(P<0.05),而组Ⅰ和组Ⅲ之间差异不显著(P>0.05)。在32日龄,组Ⅱ仔猪血清GSH-Px含量极显著或显著高于组Ⅰ和组Ⅲ(P<0.01或P<0.05),组Ⅲ显著高于组Ⅰ(P<0.05)。在45日龄,组Ⅱ和组Ⅲ仔猪血清GSH-Px含量极显著或显著高于组Ⅰ(P<0.01或P<0.05),而组Ⅱ和组Ⅲ间差异不显著(P>0.05)。(3)复方中药制剂显著提高仔猪血清中免疫球蛋白水平在整个实验期间,3组仔猪血清IgM的含量呈上升趋势,但组间差异不显著(P>0.05)。在14和24日龄,3组仔猪血清IgA的含量均无显著变化(P>0.05)。在32日龄,组Ⅱ仔猪血清IgA的含量显著高于组Ⅰ(P<0.05),组Ⅲ和组Ⅰ间差异不显著(P>0.05)。在45日龄,组Ⅱ和组Ⅲ仔猪血清IgA的含量极显著或显著高于组Ⅰ(P<0.01或P<0.05),组Ⅱ和组Ⅲ间差异不显著(P>0.05)。在14和24日龄,3组仔猪血清IgG含量差异均不显著(P>0.05)。在32日龄,组Ⅱ仔猪血清IgG含量极显著或显著高于组Ⅰ和组Ⅲ(P<0.01或P<0.05),组Ⅲ显著高于组Ⅰ(P<0.05)。在45日龄,组Ⅱ和组Ⅲ仔猪血清IgG含量极显著或显著高于组Ⅰ(P<0.01或P<0.05),组Ⅱ与组Ⅲ差异不显著(P>0.05)。(4)复方中药制剂显著提高仔猪白细胞吞噬率在14和24日龄,3组仔猪白细胞吞噬率差异不显著(P>0.05)。在32日龄,组Ⅱ仔猪白细胞吞噬率极显著高于组Ⅰ和组Ⅲ(P<0.01),组Ⅰ与组Ⅲ间差异不显著(P>0.05)。在45日龄,组Ⅱ和组Ⅲ仔猪白细胞吞噬率极显著高于组Ⅰ(P<0.01),组Ⅱ与组Ⅲ差异不显著(P>0.05)。(5)复方中药制剂显著提高仔猪淋巴细胞转化率在14和24日龄,3组仔猪淋巴细胞转化率差异均不显著(P>0.05)。在32和45日龄,组Ⅱ仔猪淋巴细胞转化率极显著或显著高于组Ⅰ和组Ⅲ(P<0.01或P<0.05),组Ⅲ显著高于组Ⅰ(P<0.05)。(6)复方中药制剂显著提高仔猪血清中白细胞介素-2含量在14日龄,3组仔猪血清白细胞介素-2含量差异不显著(P>0.05)。在24日龄,组Ⅱ仔猪血清白细胞介素-2含量显著高于组Ⅰ(P<0.05),而组Ⅲ和组Ⅰ之间以及组Ⅱ和组Ⅲ之间差异不显著(P>0.05)。在45日龄,组Ⅱ和组Ⅲ仔猪血清白细胞介素-2含量极显著或显著高于组Ⅰ(P<0.01或P<0.05),组Ⅱ与组Ⅲ间差异不显著(P>0.05)。(7)复方中药制剂对仔猪肠上皮间淋巴细胞数量有显著影响在45日龄,组Ⅱ和组Ⅲ仔猪上皮间淋巴细胞数量极显著或显著高于组Ⅰ(P<0.01或P<0.05);在十二指肠近端和回肠中段,组Ⅱ仔猪上皮间淋巴细胞数量显著高于组Ⅲ(P<0.05)。(8)复方中药制剂对仔猪肠上皮间杯状细胞数量有显著影响在45日龄,组Ⅱ仔猪小肠上皮间杯状细胞数量均极显著高于组Ⅰ(P<0.01)。在十二指肠近端、空肠近端和回肠中段,组Ⅲ仔猪小肠上皮间杯状细胞数量显著高于组Ⅰ(P<0.05);在十二指肠近端、空肠近端和空肠远端,组Ⅱ仔猪小肠上皮间杯状细胞数量极显著或显著高于组Ⅲ(P<0.01或P<0.05)。(9)复方中药制剂显著提高仔猪血清生长激素水平在14和24日龄,3组仔猪血清生长激素含量差异不显著(P>0.05)。在32和45日龄,与组Ⅰ比较,组Ⅱ和组Ⅲ仔猪血清生长激素含量均显著提高(P<0.05)。组Ⅱ和组Ⅲ间差异不显著(P>0.05)。(10)复方中药制剂显著提高仔猪胸腺及脾脏GHR mRNA表达量在45日龄,组Ⅱ和组Ⅲ仔猪胸腺中GHR mRNA表达量组极显著或显著高于组Ⅰ(P<0.01或P<0.05),组Ⅱ和组Ⅲ间差异不显著(P>0.05)。在脾脏,组Ⅱ仔猪GHR mRNA表达量显著高于组Ⅰ(P<0.05),组Ⅲ与组Ⅰ及组Ⅲ和组Ⅱ间差异不显著(P>0.05)。试验证实,日粮中添加适量复方中药制剂能显著提高仔猪的免疫机能,有效防制仔猪断奶应激综合征。
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