全反式维甲酸（ATRA）是脂肪细胞早期分化和脂代谢的调节因子,参与生命活动中一系列重要进程,包括细胞增殖分化、细胞凋亡、脂肪氧化、维持机体免疫等。大量研究证实ATRA在脂肪形成过程中具有重要作用。试验通过培养延边黄牛前体脂肪细胞,分别设置0、2×10-7、1×10-6、2×10-6、1×10-5、2×10-5mol/L浓度的ATRA处理组,分别采用MTS法、流式细胞术、Real-time PCR与Western blot技术检测ATRA调控延边黄牛前体脂肪细胞增殖、分化的作用机制,为延边黄牛高品质牛肉的生产提供理论依据。结果如下:1.ATRA对延边黄牛前体脂肪细胞增殖具有抑制作用延边黄牛前体脂肪细胞接种至多孔板24小时后添加ATRA,采用MTS法于第0、2、4、6、8天检测细胞OD值,当细胞生长至50%左右时提取总RNA,检测增殖标志基因PCNA、CDK 2、Cyclin D1基因表达量,并通过流式细胞术检测细胞所处周期。结果显示,经ATRA处理后的细胞OD值极显著降低,细胞滞留于G1/G0期,PCNA、CDK 2、Cyclin D1基因表达量均极显著降低,说明ATRA对延边黄牛前体脂肪细胞的增殖具有抑制作用。2.ATRA抑制延边黄牛前体脂肪细胞分化于诱导延边黄牛前体脂肪细胞分化的同时添加各浓度ATRA,诱导分化结束后进行油红O染色、萃取,并提取细胞总RNA及蛋白,检测PPARγ、C/EBPα、ERK 2及ADPN的mRNA与蛋白表达量,结果显示,与对照组相比,经ATRA处理过的延边黄牛脂肪细胞脂滴含量与PPARγ、C/EBPα、ERK 2 mRNA与蛋白表达量均受到抑制,且ATRA浓度越高,抑制效果越明显,ADPN基因mRNA与蛋白表达量呈上升趋势。说明ATRA可抑制PPARγ、C/EBPα、ERK 2表达,促进ADPN表达,从而抑制延边黄牛前体脂肪细胞分化。3.ATRA通过抑制AKT 2基因表达参与调控mTOR信号通路,抑制延边黄牛前体脂肪细胞分化mTOR信号通路对动物机体内胰岛素水平变化敏感,可通过感应胰岛素信号调控动物脂质生成,AKT 2位于mTOR信号通路上游,对其具有调控作用,SREBP1作为mTOR信号通路的重要因子,对其下游基因FAS、ACC均有调控作用。本研究于诱导延边黄牛前体脂肪细胞分化的同时添加不同浓度ATRA,检测AKT 2、SREBP1、FAS和ACC mRNA及蛋白表达量。结果显示,与对照组相比,AKT 2、SREBP1、FAS、ACC的mRNA及蛋白表达量表现为不同程度的下降,其中,随着ATRA浓度的升高,AKT 2、SREBP1与FAS基因表达呈线性下降,2×10-7mol/L处理组ACC基因表达量显著下降,其余处理组均极显著下降。说明ATRA通过抑制AKT 2基因表达量调控mTOR信号通路,下调mTOR信号通路相关基因SREBP1、FAS、ACC表达水平,从而抑制延边黄牛前体脂肪细胞分化。