萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)XW2发酵条件优化

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萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)XW2为本实验室从杨树健康叶片中分离保存的一株拮抗菌株。该菌株抑菌谱广,对多种病原真菌都有较强的抑制作用,是一株具有广泛应用前景的菌株。本文在前期研究的基础上,对萎缩芽孢杆菌XW2的基础发酵培养基进行筛选,并对该培养基及菌株的发酵条件进行优化,得到最适发酵培养基配方和发酵条件,并利用10 L液体发酵罐进行扩大培养,绘制菌株的生长曲线以及确定其最适放罐时间,初步研制了萎缩芽孢杆菌XW2的生防菌剂。采用菌丝生长速率法检测该菌剂对禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)、黑腐皮壳菌(Cytospora ambiens)、犁头霉(Absidia sp.)和杨树炭疽菌(Colletotrichum populi)等4株病原菌的抑菌活性,为实现萎缩芽孢杆菌XW2生防菌剂的大规模商品化生产和应用奠定了重要基础。主要结果如下:(1)筛选得到最适发酵培养基:碳源为麸皮15g,氮源为大豆蛋白胨5g,以及硫酸锰0.1 g,碳酸钙3 g,蒸馏水1 L,pH为7.0。(2)最适发酵条件:初始pH 6.5,装液量100 mL/250 mL锥形瓶,以3%接种量,在摇床转速200 rpm、温度30℃条件下达到最佳活菌量。(3)通过10 L发酵罐扩大培养确定了最适放罐时间为27 h,活菌量达到1.33×109cfu/mL。(4)用碳酸钙载体吸附初步制得XW2菌剂,检测得XW2菌剂对4种病原菌生长过程均产生影响,且抑菌活性较强,抑菌中浓度EC50值分别为4.74 mg/mL、3.33 mg/mL、4.01 mg/mL、3.32 mg/mL。
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