猪瘟是我国重大动物疫病之一,给养猪业造成重大的经济损失。猪瘟诊断技术、诊断试剂以及猪瘟疫苗等是猪瘟防制的关键,但由于猪瘟诊断方法多样,各有利弊,诊断试剂的种类多,但质量参差不齐,疫苗生产厂家繁多,但质量差异显著,国内缺乏统一标准来评价诊断方法,监控诊断试剂及疫苗生产过程、控制产品质量,确保诊断结果的一致性和可比性;国内兽用生物标准物质的建立无制备程序,建立过程不明确,且标准物质的参数值很少,不能明确表现标准物质的性质、作用等。为了解决这些问题,我们进行了猪瘟国家参考血清的研制。本论文主要从原材料筛选、候选物制备及选择、稳定性研究和协作标定等方面阐述了猪瘟国家参考血清的研制,形成了制备程序,增加了相关参数值,对新的相关标准物质的建立或标准物质的换批等提供制备与选择依据。通过实验确定了原材料的筛选原则;制备了3份猪瘟阴性血清,并经基础免疫、强化免疫试验制备了9份猪瘟阳性血清;经过一系列的物理性状、无菌性、特异性检验等,利用兔体中和试验筛选出猪瘟阴性血清、弱阳性血清、中等阳性血清和强阳性血清各1份,分别标记为标准物质A、标准物质B、标准物质C和标准物质D,进行分装、冻干、真空熔封,1ml/安瓿,分别制得1580支、1576支、1581支、1478支安瓿,物理性状检验、纯净性检验均符合要求;分装精度分别为0.1641g(变异系数4.1%)、0.1659g(变异系数3.6%)、0.1672g(变异系数3.4%)和0.1644g(变异系数2.6%),不满足小于1%的要求,剩余水份含量分别为2.35%、1.59%、1.68%、1.82%,满足小于4%的要求,对血清细胞中和试验进行条件优化后,用该方法对冻干血清进行均一性、稳定性检验,结果显示其均一性良好,即上述分装精度不会影响物质的均一性,37℃可稳定7个月,说明其稳定性良好;利用兔体中和试验和细胞中和试验两种方法完成了猪瘟国家参考血清的特性量值的初步测定,并组织协作标定,统计分析处理定值原始数据,将各协作单位分析测定的不确定度引入到猪瘟国家参考血清(标准物质A、B、C、D)的定值结果中,得到更准确的、具有置信范围的定值结果:1.兔体中和效价,标准物质A、B、C、D的定值结果分别为0 U/毫升,6.3±1.8 U/毫升,552±81 U/毫升,1899±265 U/毫升;2.细胞中和效价,标准物质A、B、C、D的定值结果分别为0 U/毫升,1.48±0.1 U/毫升,502.2±62.8 U/毫升,270.6±26.2 U/毫升。