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目的：探讨脑缺血发生时NK细胞参与脑缺血损伤及浸润机制。
方法：体内实验：免疫荧光检测人NK细胞浸润情况以及IFN-γ、IP-10表达情况和永久性大脑中动脉栓塞小鼠模型(permanent middle cerebral arteryocclusion，pMCAO)脑组织中NK细胞浸润情况以及IFN-γ、IP-10、CXCR3、表达情况；流式细胞术检测pMCAO小鼠模型脑中NK细胞浸润数目和IFN-γ表达；RT-PCR检测pMCAO小鼠模型脑中IFN-γ、IP-10表达；ELISA检测pMCAO小鼠模型外周血清中IFN-γ。体外实验：建立体外血脑屏障；ELISA检测氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation，OGD)6h内皮细胞和神经细胞上清IP-10表达；将体外血脑屏障分成NK组、NK+IP-10 blockade组，上层加入BSA-FITC，OGD6h后荧光分光光度计检测通透性；将体外血脑屏障分成NK组、NK+IP-10blockade组，流式细胞术检测NK细胞迁移数目；向NK细胞中分别加入IP-10(10ng/ml)、IP-10(50ng/ml)和IP-10(100ng/ml)，流式细胞术检测CXCR3表达几何平均荧光强度和比例。
结果：体内实验：人脑缺血组织中有NK细胞浸润和IP-10表达；建立pMCAO小鼠模型成功；pMCAO小鼠模型脑中有NK细胞浸润且表达IFN-γ、CXCR3；NK细胞浸润缺血侧多于非缺血侧，12h达到高峰(P<0.05)后逐渐下降，96h开始略有升高；NK细胞浸润比例12h明显升高(P<0.01)，48h和96h明显下降(P<0.05)；pMCAO小鼠模型脑中IFN-γ表达水平缺血侧高于非缺血侧，并于24h开始升高，逐渐升高至96h达到最高(P<0.001)；pMCAO小鼠模型外周血中24h达到小高峰(P<0.05)后下降后又逐渐升高，192h表达最高(P<0.05)；pMCAO小鼠模型脑中有IP-10表达，并于12h达到高峰(P<0.001)后逐渐下降。体外实验：IFN-γ在OGD条件下令SH-SY5Y细胞死亡率升高(P<0.05)；OGD后神经细胞表达IP-10较内皮细胞明显增多(P<0.001)；分离纯化NK细胞纯度超过90％；与Control组相比，NK组体外血脑屏障通透性明显增加(P<0.001)；与NK组相比，NK+IP-10 blockade组NK细胞迁移数目明显减少(P<0.05)。
结论：1.NK细胞参与了脑缺血损伤过程；2.NK细胞分泌的IFN-γ是参与脑损伤的主要炎性细胞因子；3.脑缺血发生时NK细胞加剧血脑屏障开放；4.脑缺血发生时IP-10通过与NK细胞表达的CXCR3结合，趋化NK细胞进入脑组织，并存在剂量依赖性。