沉默EGFR基因对MDA-MB-231细胞化疗药物敏感性的研究

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目的:体外研究三阴性乳腺癌EGFR基因的表达水平对化疗药物敏感性的影响,从而为化疗药物的选择提供更有效的预测指标,为开展乳腺癌个体化治疗提供更合理的依据。方法:已证实人乳腺癌MDA-MB-231细胞系是ER、PR及HER-2均为阴性,且EGFR基因过表达的细胞系。利用siRNA干扰技术对MDA-MB-231细胞系进行EGFR基因沉默并使用荧光定量PCR及Western -blot的方法在基因和蛋白两个水平对沉默的效果进行检测。利用CCK-8试剂对基因沉默后所得的具有不同的EGFR表达情况的细胞亚系进行阿霉素、多西他赛及5-氟尿嘧啶的药物敏感性检测。结果:对于MDA-MB-231细胞系,采用siRNA干扰技术抑制EGFR基因的抑制率为40%左右,EGFR高表达组与低表达组对化疗药物的敏感性相比,对MDA-MB-231细胞的半数抑制量IC50阿霉素为0.52±0.13vs0.22±0.06μg /ml,多西他赛为2.41±0.78vs2.05±0.55μg/ml,5-氟尿嘧啶为18.9±4.05vs19.3±4.21μg/ml。结论:对于MDA-MB-231细胞系,EGFR的表达情况与化疗药物的敏感性密切相关,沉默EGFR基因能明显提高阿霉素的敏感性,但对多西他赛及5-氟尿嘧啶的敏感性则没有明显的提高。
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